熱門關(guān)鍵詞: 細胞培養(yǎng) 恒溫搖床 移液器使用規(guī)范 江蘇恒溫振蕩培養(yǎng)箱報價 生物反應(yīng)器
用BCA蛋白定量的方法進行蛋白定量, 是保羅.史密斯團隊在20 世紀年代開創(chuàng)的 。目前已成為蛋白定量的主要實驗方法。BCA蛋白定量法是蛋白定量實驗中常用的測定方法之一,除此之外,還有Bradford法和紫外分光光度計法。
常用的bca蛋白定量試劑盒有碧云天bca蛋白定量,bca蛋白定量試劑盒等。BCA蛋白定量主要分為兩個步驟:
一是在堿性環(huán)境下將蛋白樣本中的二價銅離子轉(zhuǎn)換為一價銅,也就是將CU離子作為顯色劑,這樣的反應(yīng)過程也被成為雙縮脲 (NH2-CO-NH-CO-NH2) 反應(yīng)。
下面進入實驗的第②環(huán)節(jié),樣本中的蛋白在BCA 與銅離子的參與下進一步完成反應(yīng),形成紫紅色的絡(luò)合物。此時根據(jù)被還原的二價銅離子數(shù)估算蛋白質(zhì)濃度的函數(shù)。用分光光度計測試562 nm波段 的吸光度。通過蛋白濃度函數(shù)、吸光度等項與BSA 蛋白標準品對比,從而推算出蛋白含量即蛋白定量。
(上圖為: BCA蛋白定量實驗步驟圖)
我們知道在BCA蛋白定量實驗中,蛋白質(zhì)的肽鏈結(jié)構(gòu)會受主要影響,還有一些螯合劑與還原劑也會影響到實驗的反應(yīng)過程,比如常見的 EDTA,EGTA,DTT,
還有β- 硫 基乙醇等試劑。一般要求β-
硫 基乙醇的濃度不大于 0.001% ; EDTA 濃度低于 10mM ; 二硫蘇糖醇 DTT 試劑的話需要低于 1mM. 試劑中盡量不要使用 EGTA 強螯合劑。實踐證明, BCA蛋白定量試劑盒
中低濃度的鹽酸胍等變性劑和 NP-40 等去污劑不會對BCA法的 蛋白定量有太大影響,
實驗中可以初步忽略其干擾力。
BCA蛋白定量法是蛋白定量實驗中常用的測定方法之一,除此之外,還有Bradford 法和紫外分光光度計法。蘇州阿爾法生物 13年的生物儀器設(shè)備與耗材的行業(yè)經(jīng)驗,主要供應(yīng)的實驗室試劑包括干細胞培養(yǎng)、凝膠成像、 pcr 檢測、 ECL 發(fā)光、干細胞培養(yǎng)、 bca蛋白定量試劑盒等相關(guān)系列產(chǎn)品 。
蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區(qū)生物納米園(Biobay)A5幢301室。公司管理團隊專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年,擁有專業(yè)的技術(shù)團隊與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實驗室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校、檢測中心、科研機構(gòu)、制藥企業(yè)等13個群體。提供的實驗室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀,瑞寧移液器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,超低溫冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機,天平,離心機,離心濃縮儀、研磨機、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂楓,搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個余廠家。
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