凍干、真空蒸發(fā)、離心濃縮和氮?dú)獯祾哒舭l(fā)都是減少樣品體積的方法;但是,每種方法都涉及不同的過程,并且對(duì)樣品的影響也不同。重要的是要確定哪種蒸發(fā)方法最適合您的樣品,以便確定要使用的設(shè)備。
凍干、蒸發(fā)和濃縮導(dǎo)致液體或固體分子發(fā)生相變,導(dǎo)致水或溶劑分子以蒸氣形式離開樣品。驅(qū)動(dòng)相變的主要力量是熱能。樣品的蒸發(fā)方法主要取決于樣品能承受多少熱量。
如果樣品不受熱影響,只需將樣品放在熱板上并讓它沸騰,直到樣品體積減少到所需水平。但是,大多數(shù)樣品都會(huì)受到熱量的影響,而且生物樣品最為敏感。在熱敏樣品中,驅(qū)動(dòng)相變的熱量必須受到限制,否則樣品將被損壞。當(dāng)熱量受到限制時(shí),必須使用其他方法來驅(qū)動(dòng)分子進(jìn)行相變。
真空離心壓縮技術(shù)是用于在蒸發(fā)或凍干期間迫使分子通過相變的常用手段。液體的沸點(diǎn)在真空下大大降低,因此在較低溫度下會(huì)發(fā)生相變,需要較少的熱量輸入。因此,真空濃縮或凍干是生物或熱敏感樣品的主要方法。
另一種加速溶劑相變濃縮的技術(shù)是在樣品表面引入氮?dú)饬?。氮?dú)饬髌茐牧艘合嗪蜌庀嘀g的平衡,并促使分子進(jìn)入氣相。作為一般規(guī)則,氮?dú)獯祾哒舭l(fā)需要比真空蒸發(fā)更高的熱量輸入。因此,使用氮吹儀進(jìn)行氮?dú)獯祾哒舭l(fā)方式通常用于揮發(fā)性溶劑或在中等溫度下不易被破壞的樣品。
凍干機(jī)使用深度真空 (< .200 mbar) 和加熱來去除樣品中的水分。凍干中的干燥過程或相變屬于升華。在升華中,分子直接從固相(冰)進(jìn)入氣相(蒸汽)而不通過液相,凍干需要冷凍樣品。如果樣品的冰點(diǎn)因溶劑的存在而受到抑制,則應(yīng)在凍干前用真空濃縮除去溶劑,以便樣品可以冷凍成固體。
通過在升華中繞過液相,許多樣品的生物活力得以保留。這使得凍干成為一種獨(dú)特的蒸發(fā)方式,因?yàn)樗€可以保存生物樣品。
在真空離心濃縮蒸發(fā)中,通過將液體轉(zhuǎn)化為蒸汽來干燥樣品。真空濃縮器和蒸發(fā)器在相對(duì)較短的時(shí)間內(nèi)將液體樣品干燥至 99%,并且可以容納大多數(shù)樣品,無論其冰點(diǎn)或沸點(diǎn)如何。
真空濃縮器和蒸發(fā)器常用于樣品制備,利用離心力、熱量和真空去除樣品中的水分。濃縮器與蒸發(fā)器的不同之處在于離心力是如何產(chǎn)生的,以及熱量是如何提供給樣品的。
在真空濃縮器中,樣品被保持在以 1700 RPM 旋轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)子中,從而產(chǎn)生離心力。施加真空時(shí),離心力可防止液體從管中噴出。熱量通過真空室的壁間接施加。
渦流蒸發(fā)器使用離心力、熱量和真空來去除樣品中的水分。與真空濃縮器的旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)不同,渦流蒸發(fā)器在樣品容器內(nèi)產(chǎn)生渦流運(yùn)動(dòng),以便離心力將樣品保持在其容器中,同時(shí)對(duì)液體樣品施加真空。如果沒有將樣品保持在容器中的反作用力,它會(huì)“碰撞”或?yàn)R出容器。渦流運(yùn)動(dòng)還將分析物(分析材料)沖下玻璃器皿的側(cè)壁,增加被測(cè)分析物的回收率。在渦旋蒸發(fā)中,熱量通過固定樣品的塊直接施加到樣品中。
氮?dú)馀盼壅舭l(fā)器使用熱量和氮?dú)饬鱽碚舭l(fā)樣品中的水分。如果產(chǎn)生渦流運(yùn)動(dòng)以增加樣品的表面積,則可以增加蒸發(fā)速率。干式加熱器通常用于這些蒸發(fā)器中。
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