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分子生物學(xué)實驗常用的20種限制性內(nèi)切酶介紹
作者: dna限制性內(nèi)切酶 編輯: 限制性內(nèi)切酶 來源: 快速內(nèi)切酶報價 發(fā)布日期: 2024.04.25
信息摘要:
在分子生物學(xué)領(lǐng)域,限制性內(nèi)切酶(Restriction Endonucleases)是一類重要的酶,能夠識別特定的DNA序列并在其特定位置切…

    在分子生物學(xué)領(lǐng)域,限制性內(nèi)切酶(Restriction Endonucleases)是一類重要的酶,能夠識別特定的DNA序列并在其特定位置切割雙鏈DNA,從而產(chǎn)生特定的DNA片段。這些酶被廣泛應(yīng)用于DNA重組、基因克隆、PCR等實驗中。以下是20種常用的限制性內(nèi)切酶及其相關(guān)應(yīng)用介紹,以及在實驗中需要注意的事項。

限制性內(nèi)切酶 AscI

 1. EcoRI

- 序列識別:GAATTC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

- 注意事項:適宜的反應(yīng)緩沖液和適當(dāng)?shù)臏囟葘Ψ磻?yīng)效果至關(guān)重要。

 

 2. HindIII

- 序列識別:AAGCTT

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:應(yīng)注意避免酶的過度消耗和不必要的環(huán)境污染。

 

 3. BamHI

- 序列識別:GGATCC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

- 注意事項:反應(yīng)條件的優(yōu)化對保證酶的活性和特異性至關(guān)重要。

 

 4. XhoI

- 序列識別:CTCGAG

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

- 注意事項:應(yīng)避免酶與RNA的結(jié)合,以免影響實驗結(jié)果。

 

 5. EcoRV

- 序列識別:GATATC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:在反應(yīng)中應(yīng)嚴(yán)格控制酶的濃度,避免過度消耗。

 

 6. SalI

- 序列識別:GTCGAC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

- 注意事項:酶的保存和使用條件對保持其活性至關(guān)重要。

 

 7. XbaI

- 序列識別:TCTAGA

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

- 注意事項:應(yīng)避免酶的不必要凍融和長時間存放。

 

 8. PstI

- 序列識別:CTGCAG

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:應(yīng)選擇適宜的反應(yīng)緩沖液,以確保酶的最佳活性。

 

 9. SmaI

- 序列識別:CCCGGG

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:酶的反應(yīng)條件需要在酶活性和DNA完整性之間取得平衡。

快速內(nèi)切酶-agei內(nèi)切酶EG23501-6

 10. NotI

- 序列識別:GCGGCCGC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:應(yīng)避免酶與DNA的過度反應(yīng),以免影響DNA片段的完整性。

 

 11. KpnI

- 序列識別:GGTACC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

- 注意事項:反應(yīng)體系中的離子濃度和pH值對酶的活性有重要影響,應(yīng)予以嚴(yán)格控制。

 

 12. SacI

- 序列識別:GAGCTC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:反應(yīng)溫度和時間的選擇對酶的活性和特異性至關(guān)重要。

 

 13. SphI

- 序列識別:GCATGC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:應(yīng)避免酶與反應(yīng)體系中的其他成分發(fā)生不必要的相互作用。

 

 14. EcoRII

- 序列識別:CCWGG

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:酶的保存和稀釋應(yīng)避免超過其最佳活性濃度。

 

 15. BglII

- 序列識別:AGATCT

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的定向克隆和DNA連接實驗中。

- 注意事項:反應(yīng)體系中的酶和DNA的比例應(yīng)適當(dāng)控制,以避免浪費和不必要的反應(yīng)。

 

 16. AvaI

- 序列識別:CYCGRG

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:反應(yīng)體系中的離子濃度和溫度需要仔細(xì)控制,以確保酶的最佳活性。

 

 17. NdeI

- 序列識別:CATATG

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:酶的保存和凍融條件對其活性和穩(wěn)定性至關(guān)重要。

快速內(nèi)切酶-agei內(nèi)切酶

 18. SstI

- 序列識別:GAGCTC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:應(yīng)選擇適宜的反應(yīng)緩沖液和反應(yīng)溫度,以保證酶的活性和特異性。

 

 19. BstEII

- 序列識別:GGTNACC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:反應(yīng)時間和酶的濃度需要進(jìn)行優(yōu)化,以獲得最佳的實驗結(jié)果。

 

 20. HpaI

- 序列識別:GTTAAC

- 應(yīng)用:常用于DNA片段的切割和DNA重組實驗中。

- 注意事項:酶的穩(wěn)定性受到環(huán)境條件的影響,應(yīng)在適宜的溫度下保存和使用。

限制性內(nèi)切酶在分子生物學(xué)實驗中很常用,其特異性識別和切割DNA序列的能力使其成為DNA重組、基因克隆和PCR等實驗的關(guān)鍵工具。然而,在使用限制性內(nèi)切酶時,也需要注意一些重要事項,如優(yōu)化反應(yīng)條件、嚴(yán)格控制酶的濃度、避免酶的過度消耗和不必要的環(huán)境污染等,以確保實驗?zāi)軌蝽樌M(jìn)行并獲得可靠的結(jié)果。更多實驗室儀器實驗耗材,科研試劑請進(jìn)入蘇州阿爾法生物官網(wǎng)進(jìn)行咨詢,0512-62956104或18934597460



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