神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)較為常見的原發(fā)性惡性腫瘤。髓樣分化蛋白 2 (MD2) 作為 toll 樣受體 4 (TLR4) 的輔助受體介導(dǎo)先天免疫反應(yīng)。然而，MD2在調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤進(jìn)展和免疫細(xì)胞浸潤中的實際作用仍不清楚?？茖W(xué)研究曾在探討 MD2 是否可以通過介導(dǎo)膠質(zhì)瘤中的免疫細(xì)胞浸潤成為獨立的預(yù)后因素。

實驗方法

實驗原理

使用CGGA、TCGA和Rembrandt數(shù)據(jù)庫進(jìn)行MD2的mRNA表達(dá)和DNA甲基化差異分析，并使用Kaplan-Meier繪圖儀進(jìn)行生存分析。應(yīng)用單變量和多變量Cox回歸分析MD2的預(yù)后價值，并構(gòu)建列線圖評估MD2的臨床價值。然后，利用基因本體論（GO）和京都基因和基因組百科全書（KEGG）分析MD2相關(guān)的信號通路。此外，通過 TIMER 和 CIBERSOPT 計算 MD2 和免疫細(xì)胞浸潤之間的相關(guān)性。MD2 表達(dá)與巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞浸潤之間的相關(guān)性通過使用膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的小干擾 RNA (siRNA) 敲低 MD2 表達(dá)來實驗驗證。

結(jié)果分析(Result analysis):

 研究發(fā)現(xiàn) MD2 過度表達(dá)并與膠質(zhì)瘤預(yù)后不良有關(guān)。同時，MD2的高表達(dá)可能是膠質(zhì)瘤中MD2基因DNA甲基化程度較低的結(jié)果。此外，單變量和多變量 Cox 回歸分析表明，MD2 可能是膠質(zhì)瘤的獨立預(yù)后因素。進(jìn)一步的功能富集分析表明，MD2的功能與免疫反應(yīng)密切相關(guān)。此外，MD2的表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞和腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞的促腫瘤表型的浸潤和極化密切相關(guān)。

結(jié)論 (Result): 

     結(jié)論：這些發(fā)現(xiàn)提供了強有力的證據(jù)，表明 MD2 可以作為一種有價值的免疫相關(guān)生物標(biāo)志物來診斷和預(yù)測膠質(zhì)瘤的進(jìn)展。

      這些結(jié)果在CGGA數(shù)據(jù)庫和醫(yī)學(xué)機(jī)構(gòu)中得到驗證。實驗過程中，采集并制作組織樣本的免疫組化（IHC方法）切片，使用Ocus切片掃描顯微成像系統(tǒng)（芬蘭Grundium）進(jìn)行數(shù)字化掃描和圖像保存及導(dǎo)出，而后并根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評估分級（圖2）

組織染色切片進(jìn)行數(shù)字化掃描

病理學(xué)（冷凍切片、組織學(xué)等）

臨床研究

獸醫(yī)病理學(xué)

Ocus便攜式數(shù)字掃描顯微鏡技術(shù)規(guī)格參數(shù)

小結(jié)