如果您完全熟悉細(xì)胞培養(yǎng)，您可能聽(tīng)說(shuō)過(guò) HEK293 細(xì)胞。HEK293 細(xì)胞新藥實(shí)驗(yàn)室中 較為常用的細(xì)胞系之一。但它們是什么？為什么要使用它們？“293” 是什么意思？與HEK293T 細(xì)胞相同嗎？請(qǐng)繼續(xù)閱讀這些問(wèn)題的答案以及更多內(nèi)容。

一、什么是 HEK293 細(xì)胞？

HEK293 細(xì)胞是人類(lèi)胚胎腎細(xì)胞，起初由荷蘭生物學(xué)家 Alex Van der Eb 在 1970 年代初期分離和培養(yǎng)。Van der Eb 實(shí)驗(yàn)室的博士后 Frank Graham 用剪切的腺病毒 5 (Ad5) DNA 進(jìn)行轉(zhuǎn)染 。這是他們的第 293 次實(shí)驗(yàn)，所以就命名該細(xì)胞系為 HEK293 ，蓋細(xì)胞系的主要作用是通過(guò)細(xì)胞的基因改造實(shí)現(xiàn)重組蛋白合成。那么，HEK293T 細(xì)胞與HEK293是同一種細(xì)胞嗎？

其實(shí)，并不完全是，因?yàn)橄礖EK293T細(xì)胞的來(lái)源是將 SV40 大 T 抗原整合到 HEK293 基因組中——這意味著它們能夠從攜帶 SV40 復(fù)制起點(diǎn)的質(zhì)粒載體中產(chǎn)生大量蛋白質(zhì)。 

二、HEK 細(xì)胞有何優(yōu)點(diǎn)？

使用 HEK293 細(xì)胞有很多優(yōu)點(diǎn)。它們是一種耐寒、半貼壁、低維護(hù)的細(xì)胞系，分裂迅速，大約每 36 小時(shí)可以增長(zhǎng) 1倍。培養(yǎng)的細(xì)胞既能用于瞬時(shí)和穩(wěn)定表達(dá)，也可懸浮培養(yǎng)或作為單層培養(yǎng)，比較容易轉(zhuǎn)染，并且能夠產(chǎn)生大量的 重組蛋白。

目前，HEK293 細(xì)胞主要用于癌癥研究、新藥開(kāi)發(fā)、抗體蛋白生產(chǎn)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和蛋白質(zhì)相互作用研究等領(lǐng)域。

三、 HEK293 細(xì)胞的分類(lèi)

HEK293 細(xì)胞已被用于創(chuàng)建具有特定用途的各種衍生細(xì)胞系。

表 1：HEK293 細(xì)胞的一些常用衍生物。

四、HEK293的生長(zhǎng)條件

HEK293 細(xì)胞生長(zhǎng)對(duì)培養(yǎng)環(huán)境要求不高。一般情況下維持 37°C 和 5% CO 2的加濕培養(yǎng)箱及充足的培養(yǎng)基供應(yīng)即可滿(mǎn)足 ，為防止細(xì)菌感染，必要時(shí)可添加少許抗生素，比如：青霉素-鏈霉素-谷氨酰胺等。細(xì)胞轉(zhuǎn)染方式可以建議使用HEK293 轉(zhuǎn)染試劑盒，操作方便、簡(jiǎn)單。

五、HEK293 細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1.HEK293在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，長(zhǎng)期培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活力下降，所以培養(yǎng)代數(shù)不宜過(guò)多，通常培養(yǎng)的代數(shù)維持在13代以下，如果選擇的細(xì)胞系超過(guò)20代，需要需要解凍新的細(xì)胞重新開(kāi)始。

2.實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中需要注意無(wú)菌操作，避免支原體感染，同時(shí)做好定時(shí)檢測(cè)。

3.由于HEK293 細(xì)胞系的衍生物較多，所以培養(yǎng)時(shí)需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)。

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