光譜儀或分光光度計(jì)是用于識(shí)別或確認(rèn)樣品中物質(zhì)的化學(xué)種類、化學(xué)結(jié)構(gòu)或濃度的分析儀器。分光光度計(jì)將發(fā)射能量源通過(guò)溶液并測(cè)量不同波長(zhǎng)的光強(qiáng)度。若溶液的分子濃度較高,則可能會(huì)吸收更多的光。所以,提交用于光譜分析的樣品必須非常純凈,以避免產(chǎn)生不良或受污染的結(jié)果。 分光光度計(jì)主要由激發(fā)光源、濾光片、比色皿,以及光信號(hào)檢測(cè)器所組成。
選擇合適的分光光度計(jì)/光譜儀時(shí)要考慮的重要標(biāo)準(zhǔn):
單光束、雙光束(雙光束)和分束分光光度計(jì)有什么區(qū)別?
單光束分光光度計(jì)只有一束光,而雙光束分光光度計(jì)有兩束光。在單光束儀器中,由于只有一條光路通過(guò)樣品,因此需要手動(dòng)切換參考比色皿和樣品比色皿進(jìn)行校準(zhǔn)。雙光束分光光度計(jì)運(yùn)行速度更快并提供更可重現(xiàn)的結(jié)果,因?yàn)樗鼈儠?huì)在光束通過(guò)樣品和參考溶液時(shí)自動(dòng)校正光強(qiáng)度損失。分束儀器類似于雙光束系統(tǒng),但使用一個(gè)分束器,該分束器在使用一個(gè)檢測(cè)器的同時(shí)快速交替參考和樣品之間的光路。
比色皿評(píng)估指南
窗口:比色皿窗口應(yīng)均勻透明,沒(méi)有劃痕、混濁、夾雜物、氣泡、條紋或“彩虹”,因?yàn)檫@些問(wèn)題會(huì)對(duì)比色皿的性能產(chǎn)生負(fù)面影響。非光學(xué)面的劃痕可以忽略不計(jì)。
模具標(biāo)記:理想情況下,一盒比色皿應(yīng)具有相同的模具標(biāo)記。如果它們不相同,那么它們可能不是來(lái)自同一個(gè)模具型腔,并且在測(cè)量上本質(zhì)上會(huì)更加不一致。
性能:通過(guò)在分光光度計(jì)中運(yùn)行幾次來(lái)測(cè)試您的比色皿。將其旋轉(zhuǎn) 180 度并重新測(cè)試始終是一個(gè)好主意。值應(yīng)該非常接近。如果結(jié)果不一致,則可能是由于成型不良或與比色皿支架的配合不良。如果值差異很大,則試管窗口可能從一側(cè)到另一側(cè)不一致。在測(cè)試和使用過(guò)程中,窗口不一致、厚度和所用樹(shù)脂的質(zhì)量在關(guān)鍵波長(zhǎng)處產(chǎn)生很大差異。
儀器校準(zhǔn)
為了校準(zhǔn)分光光度計(jì),使用參考溶液將儀器歸零。該解決方案提供了一個(gè)基礎(chǔ)或零讀數(shù)。然后通過(guò)將參考溶液放入分光光度計(jì)、將設(shè)置歸零并運(yùn)行儀器來(lái)校準(zhǔn)設(shè)備。校準(zhǔn)后,就可以放心地使用了。
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