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轉(zhuǎn)染試劑在細胞轉(zhuǎn)染、細胞識別、抗體蛋白研發(fā)等領(lǐng)域廣泛使用,通常可以直接購買或者過實驗室中DIY配制。
Lipofectamine、fugene、磷酸鈣、是較為常見的轉(zhuǎn)染試劑,其實目前市場上的轉(zhuǎn)染試劑盒針對某些轉(zhuǎn)染進行了優(yōu)化,使用起來較為方便。比如:細胞類型來自于 Lonza 系列的Amaxa 人單核細胞核因子試劑盒、Invitrogen的 Silencer(R) siRNA Transfection II Kit 等試劑盒在細胞轉(zhuǎn)染方面都有著較好的效果。
一、針對 siRNA 遞送優(yōu)化的常用轉(zhuǎn)染試劑
市場上的一些生物試劑公司通過siRNA 遞送的優(yōu)化也達到較理想的轉(zhuǎn)染效果。比如: Thermo Fisher的Dharmafect 1 ,主要優(yōu)化 SMARTpool siRNA 來轉(zhuǎn)染 HepG2 細胞。 還有YEASEN的INTERFERin? siRNA/miRNA體外轉(zhuǎn)染試劑等可用來轉(zhuǎn)染 Hela或RAW264.7 等細胞。
二、Lipofectamine RNAiMAX 轉(zhuǎn)染試劑(Invitrogen)
Lipofectamine 轉(zhuǎn)染試劑可以將 siRNA 快速、轉(zhuǎn)染到多種細胞類型中,并且具有較高的效率。目前也常被用于將 siUch-L1 從 Ambion 傳遞到HEK-293 細胞,在哺乳動物細胞中導(dǎo)入Accell siRNA 等寡核苷酸也會用到該轉(zhuǎn)染介質(zhì)。國外有科研團隊也在嘗試使用 RNAiMax將FlexiTube 和 SMARTpool siRNA 轉(zhuǎn)染到 HUVEC 細胞中。
三、Lipofectamine 2000/3000 轉(zhuǎn)染試劑 (Invitrogen)
這種 Lipofectamine 試劑主要用于將 siRNA 和 shRNA 載體轉(zhuǎn)染到貼壁和懸浮細胞系中。一般情況下Lipofectamine 2000 常用于轉(zhuǎn)染例HEK293T 細胞或 Hela細胞。 Lipofectamine 3000,多用于 A498 細胞轉(zhuǎn)染等 。
四、Lipofectamine? 轉(zhuǎn)染試劑 (Invitrogen)
Lipofectamine 屬于陽離子脂質(zhì)體,因為其頭部基團帶有正電荷和 -CH2-]n-CH3。所以頂部可以與具有核酸的磷酸骨架彼此作用從而加速細胞轉(zhuǎn)染。 Lipofectamine/RNA 混合形成的脂質(zhì)體的表面電荷也允許脂質(zhì)體/核酸復(fù)合物與帶負電荷的細胞融合。
五、Oligofectamine 轉(zhuǎn)染試劑(Invitrogen)
Oligofectomine 是一種專有配方,可與核酸形成穩(wěn)定的復(fù)合物,以便將 siRNA 轉(zhuǎn)染到真核細胞中。它具有特異性且無毒。
六、MISSION? siRNA 轉(zhuǎn)染試劑 Millipore Sigma
MISSION? siRNA 轉(zhuǎn)染試劑允許將 siRNA 遞送到真核細胞中,從而產(chǎn)生 >90% 的沉默效率。使用較低濃度的 siRNA 可減少脫靶效應(yīng)。
N-Ter 納米粒子 siRNA 轉(zhuǎn)染系統(tǒng) Millipore Sigma
該系統(tǒng)允許將 siRNA 轉(zhuǎn)染到難以轉(zhuǎn)染的細胞類型中,包括神經(jīng)元、原代、分化和非分裂細胞。它基于肽轉(zhuǎn)染試劑。
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