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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司

16年專注生物實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備&耗材綜合供應(yīng)

0512-6295610418934597460

阿爾法累計(jì)贏得1000+企業(yè)的信賴和認(rèn)可
生物反應(yīng)器-懸浮細(xì)胞培養(yǎng)-細(xì)胞培養(yǎng)基-配比方案
作者: 蘇州阿爾法生物 編輯: 蘇州阿爾法 來(lái)源: 蘇州阿爾法生物官網(wǎng) 發(fā)布日期: 2021.09.23
信息摘要:
一種適合生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基配比方案。

適合生物反應(yīng)器懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基配比方案

標(biāo)簽:細(xì)胞培養(yǎng) 培養(yǎng)基 懸浮培養(yǎng) 細(xì)胞 生物反應(yīng)器 緩沖液

培養(yǎng)基是生物細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)的重要營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。動(dòng)物細(xì)胞在生物反應(yīng)器中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)主要采用懸浮培養(yǎng)方式,用于懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基主要有以下幾種:

一、平衡鹽溶液:

平衡鹽溶液簡(jiǎn)稱BSS,它在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中主要為細(xì)胞提供微量的無(wú)機(jī)鹽,起調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH、維持滲透壓平衡等作用。常用來(lái)作為洗滌液或配置稀釋培養(yǎng)基使用。實(shí)驗(yàn)中常用的平衡鹽溶液有NaCl溶液,Hanks,Earles平衡鹽,PBS緩沖液等。

一般情況下,配制細(xì)胞消化液或者洗滌細(xì)胞時(shí)會(huì)采用HanksPBS,因?yàn)檫@兩種溶液中幾乎不含鈣、鎂離子,可以減少細(xì)胞的粘附性。在密閉的培養(yǎng)器內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),多數(shù)則采用Hanks’溶液。

幾種常用的平衡鹽溶液配置方案(g/L)

名稱

無(wú)Ca2+Mg2+PBS

含Ca2+Mg2+PBS

Earle’s

Hanks’

D-Hanks’

aCl

8.00

8.00

6.80

8.00

8.00

KCl

0.20

0.20

0.40

0.40

0.40

CaCl2

-

-

0.20

0.14

-

MgCl26H2O

-

0.1

-

-

-

MgSO47H2O

-

-

0.20

0.20

-

Na2HPO4

1.15

1.15

-

0.048

0.048

NaH2PO42H2O

-

-

0.14

-

-

KH2PO4

0.20

0.20

-

0.06

0.06

NaHCO3

-

-

2.20

0.35

0.35

葡萄糖

-

-

1.00

1.00

-

酚紅

-

 

0.01

0.01

0.01

二、動(dòng)物體液、動(dòng)物組織提取液

這類培養(yǎng)基主要包含血清、淋巴液、水解蛋白等。其中血清和水解乳蛋白是實(shí)驗(yàn)中使用較多的培養(yǎng)基添加劑,同時(shí)也是細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要營(yíng)養(yǎng)成分,常使用的血清主要有胎牛血清和新生牛血清。雖然血清的營(yíng)養(yǎng)成分較高,但是由于其內(nèi)部成分較為復(fù)雜,容易導(dǎo)致下游產(chǎn)物的分離、純化工序繁瑣。所以市場(chǎng)上逐漸出現(xiàn)合成型培養(yǎng)基,比如MEMDMEM、PRMI1640.

 

三、合成細(xì)胞培養(yǎng)基

合成細(xì)胞培養(yǎng)基是根據(jù)血液及細(xì)胞組成成分的研究,確定營(yíng)養(yǎng)配比,將細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的微生物、氨基酸、微量元素及平衡鹽溶液等安一定比例配比所研發(fā)出的營(yíng)養(yǎng)組合型培養(yǎng)基。此類培養(yǎng)基廣泛適用于培養(yǎng)瓶、搖瓶細(xì)胞培養(yǎng)器和生物反應(yīng)器等實(shí)驗(yàn)設(shè)備中。常用合成型細(xì)胞培養(yǎng)基配方可參考下表:

合成細(xì)胞培養(yǎng)基的配比表(mg/L)

成份(mg/L)

BEM

DMEM

DMEM/F12

199

MEM

RPMI1640

四水硝酸鈣

-

-

-

-

-

100

氯化鈣

200

200

116.6

200

200

-

硫酸銅

-

-

0.0013

-

-

-

九水合硝酸鐵

-

0.1

0.05

0.70

-

-

七水合硫酸亞鐵

-

-

0.417

-

-

-

氯化鉀

400

400

311.8

400

400

400

六水合氯化鎂

-

-

28.64

-

-

-

無(wú)水硫酸鎂

97.67

97.67

48.84

97.67

97.67

48.84

氯化鈉

6800

6400

6999.5

6800

6800

6000

H2NaO4P

121.7

108.7

54.35

121.74

121.74

-

Na2HPO4

-

-

71.02

-

-

800

七水合硫酸鋅

-

0.432

-

-

-

L-鹽酸精氨酸

21

84

147.5

70

126

200

L-胱氨酸鹽酸鹽

15.65

63

31.29

26

31.29

65.15

L-谷氨酰胺

292

584

365

100

292

300

甘氨酸

-

30

18.75

50

-

10

L-鹽酸組氨酸

15

42

31.48

21.88

42

15

L-異亮氨酸

26

105

54.47

40

52

50

L-亮氨酸

26

105

59.05

60

52

50

L-鹽酸賴氨酸

36.47

146

91.25

70

72.5

40

L-甲硫氨酸

7.5

30

17.24

15

15

15

L-苯丙氨酸

16.5

66

35.48

25

32

15

L-絲氨酸

-

42

26.25

25

-

30

L-蘇氨酸

24

95

53.45

30

48

20

L-丙氨酸

-

-

4.45

25

-

-

L-谷氨酸

-

-

 

75

-

20

L-門冬酰胺

-

-

7.5

 

-

50

L-門冬氨酸

-

 

6.65

30

-

20

L-鹽酸半胱氨酸

-

-

17.56

0.11

-

-

L-谷氨酸

-

-

7.35

-

-

-

L-脯氨酸

-

-

17.25

-

-

20

L-羥脯氨酸

-

-

 

10

-

20

L-色氨酸

4

16

9.02

10

10

5

L-酪氨酸

18

72

38.4

40

36

20

L-纈氨酸

23.5

94

52.85

25

46

20

腺嘌呤硫酸鹽

-

-

-

10

-

-

腺苷酸

-

-

-

0.20

-

-

ADT

-

-

-

1

-

-

膽固醇

-

-

-

0.20

-

-

2-脫氧-D-核糖

-

-

-

0.50

-

-

無(wú)水葡萄糖

1000

1000

3151

1000

1000

2000

谷胱甘肽(還原型)

-

-

-

0.05

-

1

鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽

-

-

-

0.30

-

-

HEPES

-

-

3574.5

-

-

-

次黃嘌呤

-

-

2

0.30

-

-

亞油酸

-

-

0.042

-

-

-

硫辛酸

-

-

0.105

-

-

-

苯酚紅

10

15

8.10

20

10

5

D-核糖

-

-

-

0.50

-

-

乙酸鈉

-

-

-

50

-

-

胸腺嘧啶

-

-

-

0.30

-

-

聚山梨酯80

-

-

-

20

-

-

尿嘧啶

-

-

-

0.30

-

-

黃嘌呤

-

-

-

0.30

-

-

維生素C

-

-

-

0.05

-

-

維生素E

-

-

-

0.01

-

-

1,4-丁二胺酸鹽

-

-

0.081

-

-

-

丙酮酸鈉

-

110

55

-

-

-

D-生物素

1

-

0.0035

0.01

-

0.2

維生素D2

-

-

-

0.10

-

-

泛酸鈣

1

4

2.24

0.01

1

0.25

氯化膽堿

1

4

8.98

0.50

1

3

葉酸

1

4

2.65

0.01

1

1

肌醇

2

7.2

12.6

0.05

2

35

維生素K3

-

-

-

0.01

-

-

煙酸

-

-

-

0.025

-

-

煙酰胺

1

4

2.02

0.025

1

1

對(duì)氨基苯甲酸

-

-

-

0.05

-

1

鹽酸吡哆醛

1

4

2

0.025

1

-

維生素B6

-

-

0.031

0.025

-

1

維生素B2

0.1

0.4

0.219

0.01

0.1

0.2

維生素B1

1

4

2.17

0.01

1

1

胸苷

-

-

0.365

-

-

-

維生素B12

-

-

0.68

-

-

0.005

維生素A

-

-

-

0.14

-

-

pH(無(wú)碳酸氫鈉)

5.60~6.20

3.20~3.80

5.50~6.10

3.90~4.50

5.60~6.20

7.20~7.80

pH(加碳酸氫鈉)

7.40~8.00

7.20~7.80

6.50~7.10

7.00~7.60

7.30~7.90

7.50~8.10

滲透壓(無(wú)碳酸氫鈉)

238~263

238~263

265~293

238~263

238~263

225~249

滲透壓(加碳酸氫鈉)

285~315

300~332

284~314

274~302

280~310

265~293

摘自北京清大天-產(chǎn)品目錄

細(xì)胞培養(yǎng)

 

 介于國(guó)外生物反應(yīng)器成本高昂,售后服務(wù)不便,型號(hào)固定、貨期長(zhǎng)等因素,我國(guó)自主研發(fā)設(shè)備生產(chǎn)的生物反應(yīng)器目前已廣泛應(yīng)用于制藥生產(chǎn)、新藥開(kāi)發(fā)、蛋白研發(fā)、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品等環(huán)節(jié),一些國(guó)內(nèi)生物反應(yīng)器專業(yè)生產(chǎn)商甚至可根據(jù)客戶要求的尺寸進(jìn)行定制化操作,比如搏旅除生產(chǎn)固定型號(hào)規(guī)格外,還可以根據(jù)客戶要求定制不同級(jí)別、規(guī)格的生物反應(yīng)器、發(fā)酵罐主要用于微生物培養(yǎng)、種子制備、浮細(xì)胞培養(yǎng)、貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)等,實(shí)現(xiàn)了廠商直供,一罐多用,滿足不同的用戶需求。蘇州阿爾法生物13年專注于生物實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備與實(shí)驗(yàn)室試劑耗材的專業(yè)供應(yīng),實(shí)驗(yàn)室儀器中所供應(yīng)的生物反應(yīng)器可用于灌流培養(yǎng)、固定床式培養(yǎng)、攪拌通氣式培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)等多種細(xì)胞培養(yǎng)工藝。在細(xì)胞培養(yǎng) 、微載體培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)、生物制藥等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用,同時(shí)我們還提供細(xì)胞培養(yǎng)基、血清、培養(yǎng)添加劑、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、搖瓶等細(xì)胞培養(yǎng)類的試劑耗材 。同時(shí)還提供提供免費(fèi)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備安裝服務(wù)、免費(fèi)技術(shù)支持、免費(fèi)操作指導(dǎo)等服務(wù)。如需了解更多,請(qǐng)0512-62956104  18934597460進(jìn)行咨詢。

 

 

 



蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區(qū)生物納米園(Biobay)A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年,擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校、檢測(cè)中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。提供的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀,瑞寧移液器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,超低溫冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機(jī),天平,離心機(jī),離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂(lè)楓,搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個(gè)余廠家。

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