標(biāo)簽：生物反應(yīng)器  細(xì)胞培養(yǎng) 

懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的主要方法，廣泛適用于淋巴細(xì)胞、髓質(zhì)腫瘤細(xì)胞、與其他細(xì)胞融合得到的髓質(zhì)腫瘤細(xì)胞、淋巴瘤細(xì)胞、白血病細(xì)胞、白細(xì)胞、肥大細(xì)胞、肝癌細(xì)胞等，中空纖維生物反應(yīng)器對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)也是細(xì)胞規(guī)?；a(chǎn)常見(jiàn)的培養(yǎng)方式。

一、中空纖維生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)技術(shù)

中空纖維生物反應(yīng)器培養(yǎng)是由一個(gè)外殼和多個(gè)封閉在殼的中空纖維所組成的生物反應(yīng)器，其中空纖維管一般由聚砜或聚醚砜所制成，孔徑約為10 2 A~5×10 4 A之間，適宜培養(yǎng)懸浮的動(dòng)物細(xì)胞主要包括髓質(zhì)腫瘤細(xì)胞、白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等。細(xì)胞接種濃度以10 5至5×10 6細(xì)胞/ml為宜。

二、中空纖維生物反應(yīng)器懸浮細(xì)胞培養(yǎng)有哪些優(yōu)勢(shì) ?

動(dòng)物細(xì)胞包括貼壁增殖細(xì)胞和在懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)、增殖的懸浮細(xì)胞。目前已知有多種培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的方法。即貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。

與附著細(xì)胞相比，懸浮細(xì)胞通常較弱。實(shí)踐證明，懸浮細(xì)胞的難以高密度生長(zhǎng)和增殖。所以，培養(yǎng)懸浮細(xì)胞的方法主要有靜止懸浮培養(yǎng)法和使用攪拌、旋轉(zhuǎn)攪拌等的懸浮培養(yǎng)法。

然而，這些方法的缺點(diǎn)在于：

(1)需要大型設(shè)備，因?yàn)榧?xì)胞難以高密度生長(zhǎng)和增殖；

(2) 將細(xì)胞與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物、廢物等分離時(shí)比較困難；

(3)難以連續(xù)更換培養(yǎng)基；

(4)被其他微生物污染的可能性大。

中空纖維生物反應(yīng)器技術(shù)可以為懸浮的動(dòng)物細(xì)胞提供一種有效的細(xì)胞懸浮培養(yǎng)單元。當(dāng)培養(yǎng)懸浮的動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，在細(xì)胞培養(yǎng)單元中，該單元包括外殼和封閉在外殼中的開(kāi)口中空纖維，位于外殼和中空纖維之間的空間中，通過(guò)使培養(yǎng)基流過(guò)外殼內(nèi)部中空纖維，懸浮的細(xì)胞就可以高密度生長(zhǎng)和增殖。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，中空纖維的孔徑在約 20 埃至 10 5埃的范圍內(nèi)，但當(dāng)中空纖維的孔徑在 10 2埃~5×10 4 A，懸浮細(xì)胞以更高的密度生長(zhǎng)和增殖。其原因主要在于，培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換和細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物和廢物的交換進(jìn)行得較為順利，產(chǎn)生了有利于細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的環(huán)境。中空纖維生物反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)技術(shù)普遍適用于懸浮的動(dòng)物細(xì)胞，并且該方法在通過(guò)與其他細(xì)胞的細(xì)胞融合獲得的懸浮細(xì)胞的增殖中也產(chǎn)生了不錯(cuò)的效果。

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