貼壁細胞培養(yǎng)是一項常見的細胞培養(yǎng)技術，但在實際操作過程中，常常會遇到一些問題。下面將介紹貼壁細胞培養(yǎng)中常見的五大問題，并提供相應的解決方法。

1. 傳代后部分細胞漂浮

原因及解決方法如下：

- 傳代前細胞密度太大：細胞融合度達到80%時可以進行傳代操作，傳代密度需要適中，密度過高會導致傳代后細胞漂浮。

- 細胞狀態(tài)不好：可以通過提高血清比例、保持穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境等方法改善細胞狀態(tài)。

- 吹打次數過多造成機械損傷：在吹打過程中要輕柔操作，當細胞呈單顆粒時可停止吹打，避免產生氣泡。

- 培養(yǎng)基更換后不適應：可以將培養(yǎng)基換回原來使用的培養(yǎng)基，或者與原培養(yǎng)基比例混合后使用，讓細胞有一個適應期。

- 培養(yǎng)液配制和儲存不當，如pH值過堿、谷氨酰胺含量不足等原因：注意正確配制培養(yǎng)液并儲存好，確保培養(yǎng)液的質量。

2. 傳代后細胞變形

原因及解決方法如下：

- 變形但細胞仍在生長：可能是血清批次不一樣導致的，建議使用同一批次的血清，若更換血清則需要與原血清混合并逐漸過渡。

- 變形且細胞不長且碎片增多：可能是傳代操作過程中的損傷，如消化不當或細胞受到污染。應根據細胞狀態(tài)調整消化時間，嚴格進行無菌操作，確保細胞無外源性污染。

3. 細胞生長周期變慢，邊養(yǎng)邊漂

原因及解決方法如下：

- 細胞傳代時密度太稀或太密：建議在細胞融合度達到80%左右進行傳代，傳代密度適度，密度過低會延長生長周期，密度過高會造成細胞接觸抑制。

- 傳代操作不當：根據細胞特性調整消化時間，觀察細胞回縮變圓并有少量細胞脫落后終止消化，頻繁換液和清洗細胞也會影響細胞狀態(tài)，常規(guī)換液時間間隔為2-3天。

4. 傳代后細胞成團

解決方法如下：

- 低密度接種，延長換液時間，避免細胞脫落。

- 使用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)器皿，增加細胞貼壁的牢固度，減少細胞聚集成團的幾率。

- 重新鋪板，并更換新配制的培養(yǎng)基，增加血清的比例但不超過5%。

- 接種時減少培養(yǎng)基量，以加快細胞貼壁的速度，等待細胞貼壁后再補加培養(yǎng)基到正常用量。

5. 貼壁細胞培養(yǎng)時細胞出現(xiàn)空泡

原因及解決方法如下：

- 正常的細胞活動：有些細胞會出現(xiàn)正常的自噬行為或其他膜泡活動，無需特殊處理。

- 細胞營養(yǎng)不良：可能是由血清不適應、培養(yǎng)基成分改變或換液不及時等原因導致的，可以通過更換適合的血清或及時換液來解決。

- 細胞受損：注意培養(yǎng)條件和操作手法，避免機械損傷或pH值過高或過低等情況。

通過了解這些常見的貼壁問題及解決方法，可以幫助科研人員在貼壁細胞培養(yǎng)中更好地處理各種技術難題，從而獲得高質量的細胞培養(yǎng)結果。

蘇州阿爾法生物與海星生物深度合作提供以下產品與服務：

HyCyte? 干細胞、原代細胞、細胞系、三系誘導培養(yǎng)試劑、專用培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、基因編輯試劑盒、細胞株現(xiàn)貨、細胞專用血清等細胞生物學試劑。

 蘇州阿爾法提供的過氧化氫消毒液、季銨鹽消毒劑、復方季銨鹽消毒液、殺孢子劑、醇類消毒液、濃縮消毒液、除霉菌消毒液、無塵布、潔凈抹布、滅菌拖把等廣泛應用于生命科學、制藥企業(yè)、醫(yī)藥研發(fā)、疾控防御、檢驗檢疫等多種場景.

提供的服務包括：CRISPR-Cas9細胞基因編輯、載體構建,病毒包裝,分子量標準品，突變基因標準品，融合基因標準品，細胞穩(wěn)轉，細胞干擾等服務。

更多關于實驗室儀器，實驗耗材，實驗試劑，季銨鹽消毒液價格,貼壁細胞培養(yǎng)相關問題可 0512-62956104或 18934597460進行了解。

蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團隊專注于科學儀器行業(yè)十四年，擁有專業(yè)的技術團隊與完善的售后服務體系，目前已為300余家實驗室提供優(yōu)質產品和服務，涵蓋各大高校、檢測中心、科研機構、制藥企業(yè)等13個群體。提供的實驗室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機，天平，離心機，離心濃縮儀、研磨機、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內的80個余廠家。