細(xì)胞培養(yǎng)污染的兩種主要形式是化學(xué)污染和生物污染。

 化學(xué)細(xì)胞培養(yǎng)污染是指細(xì)胞培養(yǎng)物摻入對(duì)培養(yǎng)系統(tǒng)產(chǎn)生負(fù)面影響的非生命物質(zhì)。這些物質(zhì)可能是什么或在哪里可以找到它們？化學(xué)污染可能發(fā)生在：

1.培養(yǎng)基，用于細(xì)胞培養(yǎng)的生長培養(yǎng)基。這是可能發(fā)現(xiàn)大多數(shù)化學(xué)污染物的地方。

2.水：不正確的純凈水，實(shí)際上也可能是過度純凈的水。高純水實(shí)際上具有很強(qiáng)的反應(yīng)性，會(huì)導(dǎo)致用于創(chuàng)建和維持細(xì)胞培養(yǎng)的設(shè)備中浸出有毒化學(xué)物質(zhì)。

3.某些類型的血清，一種富含蛋白質(zhì)的液體。

4.內(nèi)毒素，是革蘭氏陰性菌的毒素。

5.某些類型的介質(zhì)暴露在熒光燈下時(shí)會(huì)產(chǎn)生自由基。

6.重金屬。

7.來自塑料儲(chǔ)存容器和管道的增塑劑。

8.設(shè)備上殘留的清潔劑和消毒劑。

另一種主要類型的細(xì)胞培養(yǎng)物污染來自生物細(xì)胞培養(yǎng)物污染，即通過活生物體摻入細(xì)胞培養(yǎng)物，例如：

1.細(xì)菌

2.酵母

3.病毒

4..支原體

5.原生動(dòng)物

6.無脊椎動(dòng)物

7.來自其他細(xì)胞系的交叉污染

這些生物污染物的來源包括從消毒不當(dāng)?shù)挠闷泛蜌馊苣z等。

如何識(shí)別細(xì)胞培養(yǎng)污染：

識(shí)別細(xì)胞污染可以通過多種方法檢測(cè)生物細(xì)胞培養(yǎng)污染。這些方法主要包括：

1.用肉眼目視檢查。例如，混濁的薄膜出現(xiàn)可能表明存在細(xì)菌污染。

2.顯微鏡檢查（包括電子顯微鏡、生物顯微鏡），在顯微鏡下可以觀察到許多不同種類的有害污染物的存在，比如：細(xì)菌、病毒和酵母菌。

3.測(cè)試 pH 值。例如，酵母的嚴(yán)重污染可能會(huì)增加培養(yǎng)物的 pH 值，而細(xì)菌污染會(huì)降低 pH 值。

4.采用免疫測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定，例如 ELISA 或酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，其中稱為抗體的蛋白質(zhì)附著在抗原（潛在污染物）上以揭示污染物的存在。

一般情況下，檢測(cè)化學(xué)污染通常比檢測(cè)生物污染困難得多。通常，它歸結(jié)為一個(gè)清除污染的過程。如果通過上述檢測(cè)方法排除了生物污染，那么化學(xué)污染就有可能發(fā)生。

一旦懷疑，化學(xué)污染物的鑒定可能需要以逐步的方式進(jìn)行，其中對(duì)每種可能的化學(xué)污染物進(jìn)行處理和測(cè)試。例如，可能需要測(cè)試水的純度，或者可能需要建立不同介質(zhì)、溶液之間的對(duì)比實(shí)驗(yàn)等等。

總體來說，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)物面臨的污染主要包括化學(xué)污染和生物污染兩個(gè)方面：即化學(xué)細(xì)胞培養(yǎng)物污染、細(xì)胞培養(yǎng)物被重金屬、清潔劑、毒素等非生命物質(zhì)污染和生物細(xì)胞培養(yǎng)污染物、活生物體（如細(xì)菌、酵母和真菌）等生物物質(zhì)污染。

排除細(xì)胞污染的主要方法有：可以通過顯微鏡、pH 值測(cè)試或 ELISA 等高級(jí)測(cè)試目視發(fā)現(xiàn)生物細(xì)胞培養(yǎng)污染物。對(duì)于支原體的清除可以使用支原體清除試劑盒。

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