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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司

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細(xì)胞分離-細(xì)胞分選技術(shù)的基本原理
作者： alpha 編輯： 蘇州阿爾法生物 來源： 阿爾法生物官網(wǎng) 發(fā)布日期： 2022.04.14
信息摘要：
細(xì)胞分離-細(xì)胞分選技術(shù)的基本原理：從群體中分離任何細(xì)胞類型的核心原則是利用該細(xì)胞類型獨(dú)有的一種或多種特性。特定細(xì)胞的純化對(duì)于基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)研…

細(xì)胞分離-細(xì)胞分選技術(shù)的背景

從群體中分離任何細(xì)胞類型的核心原則是利用該細(xì)胞類型獨(dú)有的一種或多種特性。特定細(xì)胞的純化對(duì)于基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)研究、細(xì)胞計(jì)數(shù)和基于細(xì)胞的再生比較重要。廣泛使用的細(xì)胞分離和分離技術(shù)可大致分為基于粘附、形態(tài)（密度/大?。┖涂贵w結(jié)合。高精度單細(xì)胞分離方法通?；谶@些特性中的一種或多種，而結(jié)合微流體的新技術(shù)則利用了一些額外的細(xì)胞特性。


細(xì)胞分離技術(shù)


細(xì)胞分離的基本原理

正負(fù)選擇方法

細(xì)胞分離程序可以是正選擇或負(fù)選擇——前者旨在從整個(gè)群體中分離目標(biāo)細(xì)胞類型，通常使用特異性抗體，而后一種策略涉及耗盡群體中的所有細(xì)胞類型，僅導(dǎo)致剩余的靶細(xì)胞。這兩種隔離方法各有優(yōu)缺點(diǎn)。由于使用了針對(duì)特定細(xì)胞類型的特異性抗體，陽性選擇會(huì)產(chǎn)生更高純度的所需細(xì)胞群。另一方面，設(shè)計(jì)一種抗體混合物來耗盡所有非靶細(xì)胞會(huì)更加復(fù)雜，從而使陰性選擇相對(duì)于純度而言效率較低。此外，通過陽性選擇分離的細(xì)胞群可以通過幾個(gè)循環(huán)的程序順序純化，負(fù)選擇性無法提供的好處。然而，陽性選擇的細(xì)胞攜帶可能會(huì)干擾下游培養(yǎng)和測(cè)定的抗體和其他標(biāo)記試劑——如果這是一個(gè)問題，最好使用陰性選擇方法。

細(xì)胞特性作為細(xì)胞分離的基礎(chǔ)

從異質(zhì)群體中分離特定細(xì)胞類型取決于該細(xì)胞類型的獨(dú)特特性。我們基于以下細(xì)胞特征討論了四大類細(xì)胞分離技術(shù)：


  • 表面電荷和粘附——該特征決定了細(xì)胞與塑料和其他聚合物表面的附著程度，可用于將貼壁細(xì)胞與懸浮/自由浮動(dòng)細(xì)胞分離。
  • 細(xì)胞尺寸和密度——尺寸和密度的物理特性通常用于細(xì)胞的批量回收；通過沉降、過濾或密度梯度離心。
  • 細(xì)胞形態(tài)和生理學(xué)——不同的細(xì)胞類型可以通過形狀、組織學(xué)染色、培養(yǎng)基選擇性生長(zhǎng)、氧化還原電位和其他視覺和行為特性來區(qū)分，然后可以利用這些特性來分離這些細(xì)胞。
  • 表面標(biāo)志物——表面抗原與抗體或適體的特異性結(jié)合可以選擇性地捕獲具有特定表面表型的細(xì)胞。隨后在可測(cè)量的探針（通常是熒光染料和磁性顆粒）的幫助下檢測(cè)捕獲的細(xì)胞，抗體/適體用這些探針標(biāo)記。


常用的細(xì)胞分離方法：

此外，上述兩個(gè)或多個(gè)原理可以結(jié)合起來進(jìn)一步提高分離細(xì)胞的特異性——通常，這種復(fù)合技術(shù)包括無標(biāo)記（列表中的前三個(gè)）方法和標(biāo)記結(jié)合方法。

為實(shí)驗(yàn)選擇細(xì)胞分離方法取決于以下標(biāo)準(zhǔn) ：


  • 細(xì)胞的可利用特性
  • 細(xì)胞類型可以承受并仍然保持活力的壓力（機(jī)械/化學(xué)/生理）量
  • 所需的細(xì)胞純度和產(chǎn)量水平
  • 可接受的污染風(fēng)險(xiǎn)（如果細(xì)胞需要培養(yǎng)，則為零）
  • 隔離方法的類型——無論是消極的還是積極的
  • 下游應(yīng)用的任何特定要求，例如細(xì)胞培養(yǎng)、核酸/蛋白質(zhì)提取等。
  • 人工、試劑、自動(dòng)化等的時(shí)間和成本。


下表 總結(jié)了不同的細(xì)胞分離技術(shù) 

技術(shù)

原則

正負(fù)

純度

屈服

塑料/粘合

表面電荷和附著力

兩個(gè)都

低的

高的

密度梯度離心

細(xì)胞密度

積極的

低的

高的

過濾

單元格大小

積極的

低的

高的

流式細(xì)胞儀

表面抗原結(jié)合

積極的

高的

低的

MACS

表面抗原結(jié)合

兩個(gè)都

高的

中等的

適體結(jié)合

表面抗原結(jié)合

積極的

高的

低的

選擇性生長(zhǎng)/培養(yǎng)

生理

消極的

中等偏上

低/中

液晶模組

形態(tài)學(xué)

積極的

高的

低的

紅細(xì)胞玫瑰花結(jié)

大小+表面抗原

兩個(gè)都

高的

中等的

免疫LCM

形態(tài)學(xué)+表面抗原

積極的

高的

低的



蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、檢測(cè)中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。提供的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)，離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個(gè)余廠家。

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