細胞培養(yǎng)是生命科學實驗的基礎(chǔ)實驗，大家習慣于科研試劑采購平臺下手，那么做過細胞培養(yǎng)的小伙伴都知道培養(yǎng)過程中的常用到的生物試劑的作用嗎？小編大概歸納了一下在細胞培養(yǎng)過程中常見試劑的作用，以便更好地了解細胞培養(yǎng)實驗。

一、了解培養(yǎng)基

雖然細胞系培養(yǎng)沒有指定固定的培養(yǎng)基，但針對不同特性的細胞所選擇的培養(yǎng)基也會有所不相同，比如貼壁培養(yǎng)選擇MEM培養(yǎng)基會具有較好的貼壁效果；懸浮細胞一般采用RPMI-1640培養(yǎng)基生長狀態(tài)旺盛；無血清培養(yǎng)的細胞一般會選擇AIM V （12005）或SFM培養(yǎng)基。

根據(jù)細胞特性在培養(yǎng)基生產(chǎn)過程中常會添加一些特殊成分： 

1.  L-谷氨酰胺

 L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)過程中主要為細胞提供能量來源，并且會參與到細胞的核酸代謝及蛋白質(zhì)合成，它的缺陷在于降解時會釋放氨基，對細胞會造成一定的毒性傷害。所以一些致敏細胞培養(yǎng)時需要注意谷氨酸鈉及氨成分的含量。

2. GlutaMAX-Ⅰ

GlutaMAX-I 二肽屬于谷氨酰胺的衍生品，其作用機理基本上與L-谷氨酰胺相一致，不同的是GlutaMAX-I 的結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，降解度低，所以釋放的氨基毒性物質(zhì)也較少，適用于無毒性的供應(yīng)能量需求。

 3.酚紅指示劑

酚紅作為一種化學指示劑，常用被于酸堿度PH 值的辨識。它在酸性環(huán)境下呈現(xiàn)顯色為黃色，中型溶液時呈現(xiàn)紅色，偏堿性環(huán)境時顯示顏色為紫色。正常情況下，酚紅作為指示劑，在細胞培養(yǎng)過程中一般不與培養(yǎng)物發(fā)生反應(yīng)，但是對于哺乳動物動物細胞培養(yǎng)時，會起到類固醇激素的細胞反應(yīng)，并且在細胞檢測時也會對檢測數(shù)據(jù)起到干擾作用。因此，一般在培養(yǎng)哺乳動物和打算做流式細胞檢測時一般不用含酚紅的培養(yǎng)基。

二．細胞培養(yǎng)、檢測過程中的試劑

1.臺盼藍染色與活細胞計數(shù)

普通細胞計數(shù)的方法將細胞懸浮液用無血清培養(yǎng)基稀釋后，加入一定比例的臺盼蘭染色液，輕搖混勻后，用血球計數(shù)板/細胞計數(shù)板中進行人工或機器計數(shù)操作。其中未染色的細胞為活細胞，染為藍色的細胞為死細胞。

2.抗生素的使用

為防止下的培養(yǎng)污染在有些細胞培養(yǎng)過程中也會適量添加抗生素或康霉菌素，由于這些添加劑雖能起到抑菌作用但會影響到細胞的正常生長和傳代，甚至出現(xiàn)毒殺細胞的作用。所以，添加時一定要進行細胞毒性測試并注意使用濃度。

3.丙酮酸鈉的添加

丙酮酸鈉在細胞培養(yǎng)過程中一般會作為葡萄糖的替代品為細胞生長提供充足的碳源，可根據(jù)細胞生長狀況添加，有的也會配備好添加在培養(yǎng)基中。

4.平衡鹽溶液、緩沖液的使用

細胞培養(yǎng)中常見的平衡鹽主要有HBS、EBS和Eagles液。

不同緩沖液的碳酸氫鈉的水平也不一致，并且緩沖液的PH也會根據(jù)培養(yǎng)產(chǎn)物及培養(yǎng)溫度的不同而產(chǎn)生相應(yīng)的變化，可根據(jù)實際情況選擇使用。

5.培養(yǎng)血清的選擇

細胞的培養(yǎng)與血清的選擇也具有較大關(guān)系。一般胎牛血清由于成本昂貴一般被用于對生長環(huán)境挑剔的難以生長的細胞，比如干細胞、神經(jīng)細胞等。普通的肌細胞、白細胞等選擇普通的新生牛血清即可。

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