隨著轉(zhuǎn)基因制藥技術的不斷發(fā)展，細胞培養(yǎng)放大的規(guī)?；枨笠苍谥饾u增大，通常在實驗室進行的小批量細胞傳代實驗由于投入成本小，操作過程熟練，基本不會存在太大問題，當進入生物反應器規(guī)?；囵B(yǎng)階段時，投入的成本往往較大，需要考慮的因素也變多，稍不注意就會影響到細胞的產(chǎn)量或質(zhì)量。

其實細胞的培養(yǎng)放大不論是處在哪個階段的放大都需要保持在同一恒定的環(huán)境下進行，這樣才能培養(yǎng)出生長密度、細胞存活率、以及培養(yǎng)產(chǎn)物等維持相對穩(wěn)定的狀態(tài)。所以在進入生物反應器擴培階段時，需要注意到以下幾點：

一、攪拌槳類型、攪拌轉(zhuǎn)速及剪切力

通常使用的攪拌式生物反應器，可以使細胞與營養(yǎng)物質(zhì)充分混合、懸浮具有較高的通氣溶氧環(huán)境，但是攪拌槳類型以及過快的攪拌轉(zhuǎn)速帶來了較高的剪切力，由于細胞不同于微生物，構(gòu)成細胞的細胞質(zhì)較為脆弱，對剪切力比較敏感，通常情況下，細胞培養(yǎng)適宜的葉端速為 1-2m/s。所以選擇合適的攪拌槳類型及合適的轉(zhuǎn)速控制也是很有必要的。搏旅的Bio PRO系列微載體培養(yǎng)生物反應器在設計時采用提升式攪拌槳在保證混合效果的同時也有效降低了細胞剪切力，對于DISKS載體來說，這種攪拌槳的設計幾乎不會因剪切力和通氣氣泡對細胞造成任何不良影響。

攪拌速率計算公式如下：

葉端速計算公式如下

二、通氣量、溶氧度、PH/DO、氧傳遞速率的參數(shù)控制 

細胞放大培養(yǎng)過程中，溶氧度參數(shù)、CO2濃度、以及通氣量的大小等重要參數(shù)都會直接影響到細胞的生長狀態(tài)，比如隨著CO2濃度的增加，PH值也會相應增大從而影響到培養(yǎng)環(huán)境的改變不利于細胞生長；所以溶氧度及二氧化碳濃度的控制需要及時準確。搏旅生產(chǎn)的Bio PRO系列微載體培養(yǎng)生物反應器系列采用了熱質(zhì)流控制儀全面實現(xiàn)了氣體流量的全自動控制；并且采用PID控制系統(tǒng)準確控制溶氧度、CO2濃度等，從而及時平衡PH參數(shù)，在通氣設計上深層通氣采用軟、硬件相結(jié)合的控制方式有效消除了培養(yǎng)基的逆流，并采用了獨立的滅菌系統(tǒng)，保證滅菌的徹底性。

三、滅菌操作的徹底性

我們知道在細胞生長過程中，微生物的危害是致命性的，滅菌的徹底性也成為影響細胞存活率的重要因素之一。在進行取樣檢驗，補充培養(yǎng)基等操作過程中很容易造成細菌污染。楚怡生物反應器設計了在位滅菌加樣/取樣閥組，有效避免了操作污染，在進氣與尾氣過濾器、物料進口、管底閥、管道等部件也都采用了獨立控制的滅菌系統(tǒng)，以達到整罐滅菌，無死角的效果，保證了滅菌的徹底性。 

除了以上幾個方面，培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)方式的選擇、攪拌槳類型、電極、溫度、混合時間、細胞密度、操作方便性、生物反應器材質(zhì)、氣體壓力調(diào)節(jié)等相關參數(shù)。由此可見，熟練掌握細胞生產(chǎn)擴培過程中的各項參數(shù)并做好記錄及數(shù)據(jù)分析是細胞規(guī)模擴培工藝的核心也是細胞的放大培養(yǎng)成功的關鍵步驟。

    蘇州阿爾法生物所提供的楚怡生物反應器常用于MDCK細胞、HEK293細胞培養(yǎng),懸浮細胞培養(yǎng)、貼壁細胞培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)、生物制藥等領域，不僅有適合實驗使用的中小型生物反應器，還可以根據(jù)不同用戶需求定制大型尺寸的生產(chǎn)型發(fā)酵罐、生物反應器。實現(xiàn)了廠商直供，一罐多用，同時我們還提供免費的安裝服務、免費技術支持、免費操作指導等服務。如需了解更多，請0512-62956104 或  18934597460 進行咨詢。

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