我們知道利用生物反應(yīng)器進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)培來生產(chǎn)蛋白類抗體的時(shí)候，培養(yǎng)基的選擇很重要。針對不同基因表達(dá)的蛋白所選用的細(xì)胞、培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)方式也不一樣。

（上圖為：細(xì)胞傳代培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基）

在生物反應(yīng)器批量生產(chǎn)細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)基的選擇一般可以依據(jù)以下條件來選擇合適的培養(yǎng)基：

一、根據(jù)細(xì)胞特點(diǎn)進(jìn)行選擇

每種細(xì)胞的生長環(huán)境不同，所需要的營養(yǎng)物質(zhì)配比也不盡相同。盡管改良型培養(yǎng)基已包含大多數(shù)細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)，但是有些特殊細(xì)胞的生長及細(xì)胞產(chǎn)物特性也決定了培養(yǎng)基中組分調(diào)整。比如多數(shù)代謝水平一般的CHO等哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜使用DMEM高糖培養(yǎng)基，而干細(xì)胞培養(yǎng)則需要使用低糖型的DMEM。由于酚紅具有類固醇激素，所以在進(jìn)行哺乳類細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),也通常不會(huì)選擇含酚紅的培養(yǎng)基。

二、根據(jù)蛋白表達(dá)及病毒特點(diǎn)進(jìn)行選擇

不同的蛋白表達(dá)產(chǎn)物所使用的接種細(xì)胞和對應(yīng)的培養(yǎng)基要求也是不同的，選擇的時(shí)候需要根據(jù)生產(chǎn)工藝及目的產(chǎn)物的細(xì)胞株來選擇合適的培養(yǎng)基。比如培養(yǎng)桿狀病毒使用LB培養(yǎng)基效果表現(xiàn)較好，而在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方面，DMEM類培養(yǎng)基則具有較多的優(yōu)勢。

三、根據(jù)培養(yǎng)方式來選擇

不同的培養(yǎng)方式使用的培養(yǎng)及也會(huì)有所區(qū)別，貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)基中必需含有血清才能使細(xì)胞旺盛生長，而懸浮細(xì)胞培養(yǎng)可以不加入血清。培養(yǎng)基中的M199和RPMI-1640在動(dòng)物細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)中使用較為廣泛。

總之，合適培養(yǎng)基的選擇主要遵循以下原則：

1.以提升細(xì)胞活力及細(xì)胞生長密度為基礎(chǔ)。

細(xì)胞活力與細(xì)胞的生長密度決定著細(xì)胞的產(chǎn)量與質(zhì)量，適宜的培養(yǎng)基可為細(xì)胞提供充足的營養(yǎng)來源和生長環(huán)境。當(dāng)細(xì)胞生長迅速，細(xì)胞活力旺盛說明選擇培養(yǎng)基與細(xì)胞匹配度較高，可以積累為實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)作為下次實(shí)驗(yàn)的參考。

2.以提高單位體積培養(yǎng)液中病毒量或抗體表達(dá)量為目標(biāo)。
生物抗體的表達(dá)滴度是衡量生產(chǎn)效率的標(biāo)準(zhǔn)，較高質(zhì)量的病毒產(chǎn)量及表達(dá)滴度，離不開上游工藝中的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)節(jié)，可以通過細(xì)胞篩選、細(xì)胞系建立、生長狀態(tài)分析、集落群體分析等方式來選擇匹配度處于優(yōu)勢的培養(yǎng)基。
3.以提升培養(yǎng)基安全性能，降低整體生產(chǎn)成本為主要優(yōu)化方向。

使用生物反應(yīng)器進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的過程基本上已經(jīng)進(jìn)入到了初試、中試甚至批量生產(chǎn)階段。這個(gè)時(shí)候培養(yǎng)基的使用顯得尤為重要，因?yàn)樯晕⑹杪┑囊蛩乜赡軐?dǎo)致巨量成本的損失。如果采用的廉價(jià)的低成本培養(yǎng)基不僅具有較多的產(chǎn)品安全隱患還可能會(huì)造成下游的產(chǎn)物純化工序工作量增加，導(dǎo)致生產(chǎn)成本加大。所以在進(jìn)行培養(yǎng)基選擇時(shí)，盡量保持選用質(zhì)量穩(wěn)定、技術(shù)實(shí)力較強(qiáng)、值的信賴的品牌產(chǎn)品。一般情況下培養(yǎng)基的選擇在細(xì)胞篩選或搖瓶培養(yǎng)階段經(jīng)確定后，放量擴(kuò)培時(shí)，盡量不要輕易改動(dòng)培養(yǎng)組分，以免造成不必要的損失。

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