原代細(xì)胞是什么？為什么要使用原代細(xì)胞？   

    基于細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)在生命科學(xué)、生物醫(yī)學(xué)和藥物研究的突破中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。實(shí)驗(yàn)和分析依賴于一個優(yōu)越的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)和細(xì)胞類型的仔細(xì)選擇。直接從組織中分離出來的原代細(xì)胞類似于正常的生理機(jī)能，并且缺乏與永生化的、基因改變的細(xì)胞系相關(guān)的修飾。這些被小心地從組織中去除并分離，然后在受控的培養(yǎng)環(huán)境中成為一個生長、健康的細(xì)胞群。

     適當(dāng)分離的原代細(xì)胞應(yīng)具有低傳代和穩(wěn)定性，具有高活力、轉(zhuǎn)染效率和加倍。分離后，這些細(xì)胞可以被膨脹、冷凍、記錄和測試。研究人員可以從許多獨(dú)特的人類和動物細(xì)胞類型中進(jìn)行選擇，有不同的大小和包裝配置，包括新鮮分離、培養(yǎng)、增殖或低溫保存的細(xì)胞。凍存管、微孔板、燒瓶或易于使用的總試劑盒提供了進(jìn)一步的選擇。組織和細(xì)胞也可以從同一供體中匹配地分離出來。

原代細(xì)胞與細(xì)胞系相比有哪些優(yōu)勢？

永生化細(xì)胞系在生命科學(xué)研究中肯定占有重要的地位。然而，對于特定的應(yīng)用和研究方案，它們可能與假陽性和假陰性、與培養(yǎng)基的次優(yōu)配對、誤導(dǎo)性的細(xì)胞生長以及由于細(xì)胞系固有的基因改變而導(dǎo)致的錯誤數(shù)據(jù)相關(guān)聯(lián)。與原代細(xì)胞相比，永生化細(xì)胞系具有重要的表型差異，并可能因修飾和傳代而失去生理特性。如果在原代細(xì)胞和體內(nèi)的研究沒有得到證實(shí)，那么有時只使用永生化細(xì)胞系的實(shí)驗(yàn)室就會承擔(dān)風(fēng)險。

在實(shí)驗(yàn)室中分離原代細(xì)胞與購買原代細(xì)胞

   許多人的研究生涯開始于實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備細(xì)胞，使用各種可用的技術(shù)和材料。對于典型的實(shí)驗(yàn)室來說，成功地從組織中分離出原代細(xì)胞需要大量的時間、金錢、設(shè)備、培養(yǎng)器、培養(yǎng)基、試劑、人力資源和培訓(xùn)，即使如此，方案和結(jié)果也各不相同，細(xì)胞也容易受到污染。此外，大量生產(chǎn)的、一般使用的培養(yǎng)基并沒有針對單個原代細(xì)胞類型的獨(dú)特要求進(jìn)行優(yōu)化。細(xì)胞培養(yǎng)方法可以有很大的不同，這 取決于個人、實(shí)驗(yàn)室、材料、試劑、細(xì)胞培養(yǎng)塑料，甚至溫度、濕度、一年時間和暖通空調(diào)系統(tǒng)！這些變量經(jīng)常導(dǎo)致數(shù)據(jù)不一致、意外成本、重復(fù)和項(xiàng)目延遲。在被污染或自己嘗試進(jìn)行污染失敗后，所以研究機(jī)構(gòu)一般會通過通過購買原代細(xì)胞來節(jié)約成本。細(xì)胞系的制造是精心隔離、質(zhì)量控制、測試、合格、嚴(yán)格特征化的細(xì)胞和培養(yǎng)基來實(shí)現(xiàn)的 。另一方面，非標(biāo)準(zhǔn)方法會對表型不一致、污染、生長不良、重復(fù)、無效結(jié)果和錯誤數(shù)據(jù)造成風(fēng)險，所有這些都會帶有大量的人員成本。不適當(dāng)?shù)募夹g(shù)和未優(yōu)化的培養(yǎng)基也會導(dǎo)致細(xì)胞死亡和分離物中不需要的細(xì)胞類型。

原代細(xì)胞優(yōu)化培養(yǎng)的提示

盡管原代細(xì)胞有許多優(yōu)勢，但除非是出所周知的挑剔，否則是培養(yǎng)的挑戰(zhàn)?？捎玫馁Y源概述了使用初級單元格實(shí)現(xiàn)最佳結(jié)果的步驟。在使用細(xì)胞之前，實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)該審查商業(yè)產(chǎn)品提供的細(xì)胞特定說明。應(yīng)注意確保選擇相應(yīng)的、優(yōu)化的、細(xì)胞特異性的生長培養(yǎng)基、試劑和培養(yǎng)條件，這有助于保持較佳的細(xì)胞健康、行為和性能。細(xì)胞培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)板必須適用于原代細(xì)胞培養(yǎng)、表面處理，在某些情況下還可以涂有促進(jìn)細(xì)胞電鍍和粘附的生物分子。

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