移液器的校準(zhǔn)，意味著確定分配體積和選定體積之間的差異。移液器校準(zhǔn)是指通過校對調(diào)整移液器，使分配的體積在一定的規(guī)格范圍內(nèi)。工廠校準(zhǔn)期間，可以通過不同的稱量在量程的MAX體積和MIN或MAX體積的 10%（以較高者為準(zhǔn)）檢查性能。當(dāng)您購買移液器時(shí)，您應(yīng)該選擇一款能夠針對不同溫度和各種粘性液體進(jìn)行重新校準(zhǔn)和調(diào)整的移液器。

在質(zhì)量體系中校準(zhǔn)移液器  

質(zhì)量系統(tǒng)中移液器校準(zhǔn)的主要目標(biāo)是確保以預(yù)期的精度進(jìn)行測量。誤差限制通常來自制造商的規(guī)格，而執(zhí)行工作所需的精度要低得多。移液器的校準(zhǔn)實(shí)質(zhì)是根據(jù)公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)（DIN 12650 或 ISO 8655）設(shè)置限制。根據(jù)質(zhì)量體系中校準(zhǔn)移液器的程序如下： 

一、設(shè)備要求和測試條件

1.平衡度測定：

天平的刻度值應(yīng)根據(jù)所選的移液器體積來選擇。

注意：使用已知砝碼定期檢查您的天平校準(zhǔn)情況。

2.測試液體要求：

蒸餾水或去離子水，“3 級”，符合 ISO 3696。測試水在校準(zhǔn)前至少在校準(zhǔn)室中放置 2 小時(shí)，以達(dá)到與測試室條件的平衡。測試室條件要求：

3.測試在 20C 至 25C 的恒定 (+/- 0.5C) 溫度下在無氣流的房間中進(jìn)行。建議相對濕度在 45% 以上。尤其是體積在 50 vl 以下的情況下，空氣濕度應(yīng)盡可能高，以減少蒸發(fā)損失的影響。

- 測試室內(nèi)的移液器、水和空氣應(yīng)處于相同溫度。

- 新吸頭應(yīng)預(yù)先潤濕 1 至 3 次以提高準(zhǔn)確性。

- 始終從水箱中吸取水，不要從天平中取回水。

- 根據(jù)使用頻率和應(yīng)用情況定期檢查校準(zhǔn)，但至少每年一次。如果每天使用，建議間隔三個(gè)月。

二、一般移液器校準(zhǔn)程序

1.收到需要校準(zhǔn)的移液器后，每個(gè)移液器都小心地打開包裝并檢查是否有任何可見的損壞跡象。發(fā)現(xiàn)的任何可見損壞都會立即報(bào)告給客戶?？蛻魧⒈桓嬷獡p壞是否可以修復(fù)以及將收取哪些額外費(fèi)用?？蛻魧l(fā)出新的工作訂單以支付維修費(fèi)用。

2.對每個(gè)移液器進(jìn)行輻射污染掃描。發(fā)現(xiàn)的任何輻射污染都會立即報(bào)告給客戶，并且移液器將被拒絕校準(zhǔn)。

3.所有客戶的移液器都經(jīng)過計(jì)數(shù)，并與提供的工作訂單上報(bào)告的數(shù)量進(jìn)行比較。任何數(shù)量差異都會立即報(bào)告給客戶?？蛻魧⒂袡C(jī)會找到任何缺失的數(shù)量，否則工作訂單將需要修改并由客戶簽署。

4.每個(gè)工作訂單將被放置在一個(gè)單獨(dú)的內(nèi)部存儲箱中，直到計(jì)劃進(jìn)行校準(zhǔn)。

為每個(gè)工作訂單分配單獨(dú)的工作 ID 號。

6.檢查客戶信息與存檔信息的任何差異，并在需要時(shí)進(jìn)行更正。所有移液器都在分配的作業(yè) ID 號下輸入 Cal Lab 數(shù)據(jù)庫，并為每個(gè)儀器分配 ID 號。

三、預(yù)校準(zhǔn)程序

• · 在校準(zhǔn)和任何移液器調(diào)整之前獲得和記錄的數(shù)據(jù)也將被記錄下來。
• · 每個(gè)移液器都將在制造商指定的MIN和MAX量程點(diǎn)進(jìn)行測試。每個(gè)點(diǎn)進(jìn)行十次測試。
• · 作為預(yù)防性維護(hù)的一部分，每個(gè)移液器都根據(jù)制造商的圖表進(jìn)行拆卸，并用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)溶液徹底清潔。
• · 所有零件都經(jīng)過仔細(xì)檢查，活塞在大多數(shù)情況下都經(jīng)過拋光，活塞密封和 O 形圈以及所有有缺陷和故障的零件都已更換。完成后，將根據(jù)制造商的圖表和程序重新組裝每個(gè)移液器。再次目視檢查移液器的功能是否正常。

四、移液器校準(zhǔn)步驟
1.在移液器校準(zhǔn)開始時(shí)，每個(gè)移液器在進(jìn)行任何調(diào)整之前都會預(yù)先檢查 3 次。如果移液器失敗，將執(zhí)行適當(dāng)?shù)男?zhǔn)調(diào)整。校正后，每臺儀器將在最低和最高量程點(diǎn)進(jìn)行校準(zhǔn)，每個(gè)測試點(diǎn)進(jìn)行10 次測試。

2.校準(zhǔn)數(shù)據(jù)將被記錄并報(bào)告在校準(zhǔn)報(bào)告中。

3.為每個(gè)移液器發(fā)布校準(zhǔn)報(bào)告以及整個(gè)工作的校準(zhǔn)摘要。適當(dāng)?shù)募夹g(shù)人員簽署報(bào)告。

創(chuàng)建校準(zhǔn)標(biāo)簽并貼在每個(gè)移液器上。所有移液器都經(jīng)過交叉核對客戶提供的文書工作以及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)創(chuàng)建的文檔。

4.QC 主管檢查隨機(jī)選擇的移液器的整體性能。

5.如果檢測到任何錯(cuò)誤，則將整個(gè) Job 送回以進(jìn)行重新檢查。

6.QC 主管批準(zhǔn)工作，移液器經(jīng)過仔細(xì)包裝并隨附所有校準(zhǔn)文檔交付給客戶。

移液器誤差的來源：

l 揮發(fā)性液體蒸發(fā)。在飽和空氣中使用。

l 高密度液體下沉。改變技術(shù)。

l 粘性液體會粘在尖端。改變技術(shù)。

l 親水吸頭將保留液體。預(yù)濕筆尖。

l 浸入式吸頭攜帶液體。浸入 2-3 毫米。

l 有角度的移液器會吸收更多的液體。保持垂直。

l 表面張力會降低精度。改變技術(shù)。

l 冷熱液體。在室溫下吸取液體。

l 人的因素。練習(xí)和觀察技術(shù)。

五、移液器校準(zhǔn)計(jì)算公式：

質(zhì)量到體積的轉(zhuǎn)換

V = (w + e) x Z

V = 體積 (vl)

w = 重量（毫克）

e = 蒸發(fā)損失 (mg)

Z = mg/vl 轉(zhuǎn)換的轉(zhuǎn)換系數(shù)

注意：蒸發(fā)損失可能在體積小時(shí)明顯。要確定質(zhì)量損失，請將水分配到稱量容器中，記下讀數(shù)并開始用秒表計(jì)時(shí)。檢查讀數(shù)在 5 秒內(nèi)下降了多少。將此與移液時(shí)間進(jìn)行比較。通常，移液時(shí)間可能為 5 秒，質(zhì)量損失高達(dá) 2 mg。如果在容器上使用蒸發(fā)阱或蓋子，則無需進(jìn)行蒸發(fā)校正。

換算系數(shù) Z 用于計(jì)算在測試溫度和壓力下懸浮在空氣中的水的密度。請參見第 15 頁的轉(zhuǎn)換表 1。

準(zhǔn)確度（系統(tǒng)誤差）

準(zhǔn)確度是移液器的分配體積和選定體積之間的差異。

精度在移液器校準(zhǔn)證書上以相對值表示：

精密度（隨機(jī)誤差）
精密度是指移液的可重復(fù)性。它表示為標(biāo)準(zhǔn)偏差 (s) 或變異系數(shù) (cv)。除了移液器的特性外，實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐和用戶體驗(yàn)是影響精度的主要因素。 

根據(jù) DIN 12650 的誤差（F 值）

DIN 標(biāo)準(zhǔn)沒有給出準(zhǔn)確度和精密度的單獨(dú)限制，而是使用組合誤差限制：F 值。

F = | 一個(gè) | + 2 xs

計(jì)算相對 F 值：

F% = | % | + 2 x 數(shù)量

表 2 顯示了根據(jù) DIN 12650 標(biāo)準(zhǔn)對單通道空氣置換移液器的誤差限制。對于多道移液器，這些限制加倍。對于可變?nèi)萘恳埔浩?，?biāo)稱容量是最大容量。標(biāo)稱體積的絕對 vl 限制適用于整個(gè)體積范圍內(nèi)的每個(gè)選定體積。

例如，對于 20-200UL的移液槍，每個(gè)選定體積的誤差限制為2.0ul。如果移液器的標(biāo)稱體積介于表中的數(shù)值之間，則使用最接近體積的相對誤差限值 F%。如果標(biāo)稱體積正好在表 2 中的兩個(gè)體積之間，則使用較低體積的相對誤差限值 F%。

移液器精密度和準(zhǔn)確度的評估

無差錯(cuò)移液需要精密度和準(zhǔn)確度。許多因素會影響這些規(guī)格，它們是評估移液器性能的主要定量參數(shù)。

例如當(dāng)設(shè)置體積為 20 vl 時(shí)：準(zhǔn)確但不精確：平均體積是正確（設(shè)定）體積，但單獨(dú)移液與設(shè)定體積不同。

精確，但不準(zhǔn)確：單獨(dú)移液之間沒有變化，但平均體積與設(shè)定體積不同。

準(zhǔn)確和精確：平均體積是設(shè)定的體積，不同移液之間沒有差異。

1. 移液器垂直，吸頭浸入液體約 1 cm。

2. 移液器垂直，吸頭浸入液體約 3 cm。

3. 30×40度角移液器；尖端浸入液體中約 3-4 厘米。

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