組蛋白去乙?;缚贵w簡(jiǎn)稱是簡(jiǎn)稱“HDAC”。目前存在許多依賴于使用組蛋白去乙?;?/span> (HDAC) 抗體來探索生物樣品中存在的蛋白質(zhì)并查看它們?nèi)绾闻c其他生物分子相互作用從而揭示相關(guān)因素的信息。包括 DNA pull-down、ChIP、免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)印跡在內(nèi)的檢測(cè)都使用了這種抗體。從這些方法中受益匪淺的領(lǐng)域包括癌癥研究和藥理學(xué)。
組蛋白去乙?;?/span> (HDAC) 抗體的意義
人類細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的基本過程,例如細(xì)胞周期的進(jìn)展、轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)和其他發(fā)育活動(dòng),依賴于 DNA 組蛋白內(nèi)的賴氨酸殘基的乙酰化機(jī)制及其逆過程脫乙?;貏e是在組蛋白內(nèi)。 N端尾域。在組蛋白去乙?;^程中,組蛋白去乙?;?(HDAC) 催化乙酰官能團(tuán)從組蛋白中去除。這可以通過使用利用組蛋白脫乙酰酶 (HDAC) 抗體的方法來觀察。組蛋白去乙?;?(HDAC) 的活性會(huì)導(dǎo)致乙?;浇档停梢酝ㄟ^染色質(zhì)濃縮狀態(tài)對(duì)基因表達(dá)的相關(guān)抑制來測(cè)量。
研究發(fā)現(xiàn)了許多適合四個(gè)離散組的組蛋白脫乙酰酶 (HDAC) 抗體。一類抗體主要存在于細(xì)胞核內(nèi)。在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中發(fā)現(xiàn)了第二類抗體,大約是第一類抗體的兩倍。第三類占據(jù)細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)并被NADH激活。最后的第四類只有一種抗體,HDAC11。
研究用途
組蛋白去乙酰化酶 (HDAC) 抗體可用于了解細(xì)胞內(nèi)的組蛋白去乙?;?。許多研究方法都依賴這些抗體來檢測(cè)和分析生物樣本中存在哪些蛋白質(zhì)以及它們?nèi)绾蜗嗷プ饔?。它們目前是以下研究方法的關(guān)鍵:
DNA下拉分析:
DNA pull-down 檢測(cè)用于檢測(cè)蛋白質(zhì)相互作用,可以從生物樣品中提取蛋白質(zhì) DNA 復(fù)合物。該方法涉及使用通過使用針對(duì)靶蛋白的抗體分離的DNA探針。然后可以通過進(jìn)一步分析(通常是 PCR 或 Southern 印跡)來鑒定與蛋白質(zhì)結(jié)合的未知 DNA 序列。例如,這類研究已被用于揭示某些基因表達(dá)在疾病(如癌癥)中的作用。
芯片檢測(cè):
ChIP 或染色質(zhì)免疫沉淀是一種強(qiáng)大且適應(yīng)性強(qiáng)的檢測(cè)方法,用于觀察細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)-DNA 相互作用。它還可以同時(shí)識(shí)別與特定基因組相關(guān)的多種蛋白質(zhì),以及識(shí)別與特定蛋白質(zhì)相關(guān)的基因組。組蛋白去乙?;?(HDAC) 抗體已用于這些測(cè)試場(chǎng)景,具體而言,它們已被用于揭示與癌癥發(fā)展相關(guān)的蛋白質(zhì)相互作用。
免疫組化:
免疫組織化學(xué)過程涉及識(shí)別生物樣品細(xì)胞內(nèi)的抗原(蛋白質(zhì)),它是最常見的免疫染色技術(shù)。它利用了抗體與生物樣品中的某些抗原結(jié)合的事實(shí)。組蛋白去乙?;?/span> (HDAC) 抗體常用于該測(cè)定。同樣,這種方法已被用于癌癥研究領(lǐng)域,并且能夠確定涉及組蛋白去乙?;?(HDAC) 抑制劑的淋巴惡性腫瘤的可能新治療途徑。
蛋白質(zhì)印跡法:
Western印跡,也稱為免疫印跡,是一種常用的檢測(cè)生物組織內(nèi)蛋白質(zhì)的技術(shù)。它涉及通過電泳分離,然后用抗體染色。組蛋白去乙?;?/span> (HDAC) 抗體通常在染色過程中使用。用這些抗體染色有助于揭示腫瘤生長(zhǎng)和進(jìn)展的機(jī)制。
研究領(lǐng)域
使用組蛋白去乙酰化酶 (HDAC) 抗體的潛在研究領(lǐng)域非常廣泛。然而,在某些領(lǐng)域,這些抗體的使用已被證明更為重要。
使用組蛋白去乙?;?/span> (HDAC) 抗體的工作使癌癥研究受益匪淺。上述分析已成功用于揭示支持不同種類癌癥發(fā)生和生長(zhǎng)的各種過程的細(xì)節(jié)。他們已經(jīng)能夠強(qiáng)調(diào)特定基因的重要性,并提出它們?nèi)绾斡绊懓┌Y。此外,藥理學(xué)依賴于使用這種抗體來開發(fā)和測(cè)試新的藥理學(xué)藥物。它們已被用來幫助確定藥物在達(dá)到預(yù)期用途的情況下將如何發(fā)揮作用,以及它們的效率可能是多少。
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