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腫瘤動物模型是研究腫瘤發(fā)生、生長和新藥效果的重要工具。通過建立合適的腫瘤模型,可以深入了解腫瘤的發(fā)展過程,評估新藥的效果。本文將介紹腫瘤動物模型的建立步驟和應(yīng)用,并分享實驗中的一些經(jīng)驗。
1. 腫瘤細胞的收集與準(zhǔn)備:
我們需要獲得對數(shù)生長的腫瘤細胞??梢再徺I腫瘤細胞系現(xiàn)貨,或采集腫瘤組織進行細胞培養(yǎng)。將收集的腫瘤細胞加入無血清基質(zhì)中,并進行離心和洗滌,以去除不希望的成分。最后,用血球計數(shù)器計算腫瘤細胞數(shù)量,并調(diào)整細胞密度至合適的濃度。
2. 小鼠的接種與觀察:
選擇合適的小鼠品系,并在6-8周齡的小鼠中接種腫瘤細胞。每只小鼠腋下接種一定數(shù)量的腫瘤細胞。大約2周后,可觸及腫瘤小結(jié)節(jié)的形成。每隔3天使用游標(biāo)卡尺測量腫瘤的縱橫大小,并記錄下來。這個步驟需要持續(xù)至少一個月,以觀察腫瘤的生長情況和變化。
3. 實驗組與對照組的設(shè)計:
在實驗中,需要設(shè)計不同的實驗組和對照組,以評估不同干預(yù)和新藥效果。每組動物數(shù)一般為5-10只,確保實驗結(jié)果的可靠性和統(tǒng)計學(xué)意義。
4. 取樣和處理:
在小鼠腫瘤生長至直徑15-20毫米,即小鼠瀕臨死亡時,可以取血樣分離血清并保存,以進行后續(xù)的實驗分析。同時,可以處死小鼠并取出腫瘤組織進行拍照,以記錄腫瘤的形態(tài)特征。還可以取部分腫瘤組織作為冰凍組織切片,并進行適當(dāng)?shù)拿庖呓M織化學(xué)染色。另外,也可以取部分腫瘤組織用3%中性甲醛固定,進行常規(guī)HE染色。
5. 腫瘤動物模型的應(yīng)用:
建立好的腫瘤動物模型可以廣泛應(yīng)用于腫瘤研究領(lǐng)域。通過該模型,可以評估新藥效果,以確定適宜的方案和劑量。還可以研究腫瘤的生長機制、轉(zhuǎn)移過程以及與宿主的相互作用。另外,腫瘤動物模型也可用于研究腫瘤CAT、腫瘤學(xué)等領(lǐng)域。
通過合理的實驗設(shè)計和嚴(yán)謹?shù)牟僮?,可以建立穩(wěn)定可靠的腫瘤模型,并應(yīng)用于不同領(lǐng)域的研究。同時,我們需要不斷總結(jié)經(jīng)驗,優(yōu)化實驗方案,為腫瘤研究提供更有力的支持。
附小鼠尾靜脈注射方法:
在靠近實驗臺邊緣處, 用大培養(yǎng)皿扣住小鼠, 左手抓住小鼠尾巴, 用酒精棉 球擦尾巴, 可見到兩側(cè)靜脈; 注射前應(yīng)確認針管內(nèi)無氣泡, 注射時由尾尖開始, 順向刺入。失敗后再逐漸移向根部重刺, 若準(zhǔn)確刺入靜脈內(nèi), 推進時無阻力, 一般可注入 0.1—0.5ml。
該實驗經(jīng)驗分享文章詳細介紹了腫瘤動物模型的建立步驟和應(yīng)用,以及一些實驗中的經(jīng)驗。希望以上內(nèi)容對您有所幫助!
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