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標簽:微生物培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基 細菌培養(yǎng) 選擇性培養(yǎng)基 微生物分類 微生物
根據(jù)微生物類型和培養(yǎng)基的組成,微生物培養(yǎng)基通??梢苑譃椋合薅ㄅ囵B(yǎng)基、復(fù)雜培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基。在確定的培養(yǎng)基中,確切的化學(xué)成分是已知的。這些類型的培養(yǎng)基通常由純生化物質(zhì)組成,通常用于研究微生物的最低營養(yǎng)需求。相比之下, 復(fù)雜介質(zhì) 的確切化學(xué)成分尚不清楚。復(fù)雜介質(zhì)培養(yǎng)基類型通常包含生物來源的試劑,例如酵母提取物和蛋白胨,其中確切的化學(xué)成分未知。復(fù)雜培養(yǎng)基通常提供多種生長因子,有助于未知和挑剔的細菌物種的培養(yǎng)。
當(dāng)然培養(yǎng)基也可以配制為選擇性的或富集的。比如:選擇性介質(zhì)被配制以抑制某些細菌物種的生長或促進特定物種的生長。這些培養(yǎng)基可以包含額外的選擇性試劑,例如高鹽濃度以選擇嗜鹽菌,或者可以在選擇性生長條件下使用。一增菌培養(yǎng)基 還允許特定細菌物種的生長; 然而,富集培養(yǎng)基中添加了一種試劑,允許而不是抑制特定物種的生長。
通常,微生物培養(yǎng)基是蛋白質(zhì)、鹽、微量元素、氨基酸和碳水化合物的混合物。這些成分的存在和數(shù)量在細菌物種之間可能有很大差異,具體取決于每個菌株的宏量和微量營養(yǎng)素需求。細菌菌株的培養(yǎng)方式不同所選用的培養(yǎng)基也會有所不同。例如:液體培養(yǎng)基通常用于純分批培養(yǎng)物的生長和繁殖,而固體瓊脂培養(yǎng)基用于分離純培養(yǎng)物。
除了提供營養(yǎng)外,液體培養(yǎng)基還有助于維持 pH 值。pH 值可以通過一種或多種緩沖系統(tǒng)維持,例如 3-(N-嗎啉代) 丙磺酸 (MOPS) 或磷酸鉀。滲透環(huán)境可以通過添加鹽類來維持,例如氯化鈉。各種培養(yǎng)基的配方可以在蘇州阿爾法生物實驗器材網(wǎng)站上找到。
下面以ATCC為例,介紹幾種用于細菌的常用微生物培養(yǎng)基:
Brain Heart Infusion Agarose (BHI) 是一種復(fù)雜的、營養(yǎng)豐富的、通用的生長培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)苛養(yǎng)和非苛養(yǎng)微生物,包括鏈球菌和肺炎球菌。它是從牛或豬腦和心臟組織的脫水輸液中產(chǎn)生的。該培養(yǎng)基可以補充氯化鈉和磷酸二鈉,分別用于滲透和 pH 維持。ATCC 目前使用由 Becton, Dickinson and Company (BD) 提供的 BHI 瓊脂和肉湯培養(yǎng)基。
淋球菌 (GC) 培養(yǎng)基 是一種用于培養(yǎng)淋病奈瑟菌和其他苛養(yǎng)菌的生長培養(yǎng)基。它可用作制備巧克力瓊脂、Thayer-Martin 培養(yǎng)基、Martin-Lewis 瓊脂和 Transgrow 瓊脂的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。GC 培養(yǎng)基由 GC 瓊脂基質(zhì)、干牛血紅蛋白和可從 BD 獲得的 IsoVitaleX 的混合物制備。對于特定生物的選擇性生長,該培養(yǎng)基可以補充抗生素,包括氯霉素、鏈霉素、四環(huán)素和氨芐青霉素。
嗜血桿菌測試培養(yǎng)基 (HTM) 由酵母提取物、Mueller Hinton 肉湯、豬血紅素和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD) 的復(fù)雜混合物組成。主要成分 Mueller Hinton 瓊脂起初是作為固體培養(yǎng)基制備的,用于測試常見的、不挑剔的、快速生長的生物體的抗菌敏感性測試。然而,這種初始培養(yǎng)基不適用于諸如鏈球菌、淋球菌和嗜血桿菌等挑剔的生物。 5 HTM 隨后被開發(fā)用于測試苛刻的生物。
Luria-Bertani 肉湯培養(yǎng)基 (LB) 是 ATCC用于分子生物學(xué)應(yīng)用的大腸桿菌繁殖和維持的通用培養(yǎng)基。它是使用 BD 提供的 LB 肉湯混合物在 Miller 組合物中制備的,該混合物由胰蛋白胨、酵母提取物和氯化鈉組成。LB 也可以通過加入瓊脂制成固體培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通常補充有各種抗生素以維持質(zhì)粒 DNA。
海洋肉湯 是一種選擇性的復(fù)雜生長培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)異養(yǎng)海洋細菌。海洋環(huán)境提供了一組獨特的生長條件,包括高鹽度和低溫。為了模擬這種環(huán)境,用蛋白胨、酵母提取物和高鹽含量配制海洋肉湯。ATCC 使用來自 BD 的 Marine Broth 2216 制劑生成這種培養(yǎng)基。海洋肉湯也可以通過添加瓊脂制成固體培養(yǎng)基。
Middlebrook 7H9 肉湯 主要用于分枝桿菌屬的生長和繁殖。該培養(yǎng)基由 Middlebrook 7H9 肉湯、甘油、丙酮酸鈉和白蛋白-葡萄糖-過氧化氫酶 (ADC) 富集物制成。
Middlebrook 7H10 瓊脂培養(yǎng)基主要用于從臨床和非臨床標本中分離和培養(yǎng)分枝桿菌。該培養(yǎng)基是由 Middlebrook 7H10 肉湯、甘油和油酸-白蛋白-葡萄糖-過氧化氫酶 (OADC) 富集的混合物制成的。它與 Middlebrook 7H9 肉湯的不同之處在于幾種鹽的濃度以及添加 OADC 富集而不是 ADC 富集。該培養(yǎng)基基于改進的配方,旨在促進體外分枝桿菌的早期生長 。
改良碎肉培養(yǎng)基 是一種非選擇性、復(fù)雜的微生物培養(yǎng)基,支持大多數(shù)孢子形成和非孢子形成專性厭氧菌的生長。該培養(yǎng)基由碎牛肉(無脂肪)、氫氧化鈉、胰蛋白胨、酵母提取物、血紅素、磷酸二鉀和維生素 K1 溶液的復(fù)雜混合物組成。根據(jù)每個厭氧菌株所需的生長條件,ATCC 還用各種試劑補充這種培養(yǎng)基,如葡萄糖、精氨酸或甲酸和富馬酸的組合。
營養(yǎng)瓊脂/肉湯 是一種用于培養(yǎng)非苛刻細菌菌株的通用型微生物培養(yǎng)基。ATCC 使用 BD 提供的脫水原液制備該培養(yǎng)基,該原液由牛肉提取物和蛋白胨組成。這種培養(yǎng)基可以通過加入心臟浸液肉湯來進一步豐富?;蛘?,通過添加不同濃度的氯化鈉,該培養(yǎng)基也可用于特定菌株的選擇性生長。
強化梭菌培養(yǎng)基 常被用于由ATCC厭氧菌,特別的培養(yǎng)和回收梭菌物種,來自各種來源。ATCC 使用來自 Oxoid Limited 或 BD 的脫水培養(yǎng)基制備這種培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基由鹽、胰蛋白胨、牛肉提取物、酵母提取物、葡萄糖、淀粉和 L-半胱氨酸 HCl 的復(fù)雜混合物組成。
胰蛋白酶大豆瓊脂 是一種用于分離和繁殖多種細菌菌株的培養(yǎng)基。ATCC 通常使用 BD 提供的胰蛋白酶大豆基質(zhì)制備這種培養(yǎng)基,并輔以 5% 的去纖維羊血。胰蛋白酶大豆基混合物由胰蛋白胨、大豆蛋白和氯化鈉組成。添加羊血有助于促進更挑剔的細菌的生長。
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