移液器校準同樣是保證移液工具準確度及實驗準確率的關鍵，下面就移液器校準相關問題進行解答，希望能對您的實驗有所幫助。

一、移液器校準的重要性

在實驗室中需要高精度的實驗中，移液器用于精確測量和轉(zhuǎn)移少量液體。

然而，移液器測量中的誤差來源可能來自設備故障或操作員的誤操作。分配體積的任何差異都可能影響 qPCR 結(jié)果等實驗的結(jié)果和重現(xiàn)性。

因此，有必要每隔幾個月檢查一次移液器校準，以通過分配正確的體積來確保準確性。這就是為什么移液器校準被認為是良好實驗室規(guī)范 (GLP) 的基本部分的原因。

在上一篇文章中，我們討論了保持移液器準確度的技巧——今天我們將學習如何進行移液器校準。

二、移液器校準原理

在 20 ° C 的溫度和一個大氣壓下，水的密度保持恒定在 1 g/mL。這意味著可以通過稱量分配的水來確定水的體積。

但是，溫度和氣壓的變化會影響測量的準確性。在實踐中壓力的影響可以忽略不計，但應考慮溫度。這是使用 Z 系數(shù)或“Z 校正系數(shù) ”完成的，該系數(shù)用于計算水量。

將計算體積與理論體積進行比較，您可以確定移液器的準確度。

表 1 顯示了不同溫度下蒸餾水的 Z 因子

三、移液器校準的步驟

注意：您應該使用兩個不同的體積檢查移液器的校準。

在燒杯中取蒸餾水并記錄其溫度。

根據(jù)移液器可以分配的小體積和大體積，收集您的移液器和正確的吸頭。

將稱量舟放在可精確稱量微克范圍的天平上，關閉天平門后將其歸零。

通過抽吸和排出設定的體積 3 次預沖洗吸頭，然后完全推動以去除任何殘留的液體。

在不形成氣泡的情況下吸入校準體積，然后將液體緩慢分配到稱重舟中。然后，在天平上記錄重量并重復該過程十次。

使用等式計算分配體積：
V = W x Z
其中，
W = 水的重量
Z = Z 因子（見表 1 ）
V = 計算的分配水體積。

接下來，確定十次試驗的平均值。

可以使用以下公式計算準確度：
A = 100 x V avg /V 0
其中，
A = 移液器的準確度
V avg = 平均計算體積
V 0 = 您嘗試分配的理論體積。

如果準確度值在 99-101% 范圍內(nèi)，則認為移液器正常并已校準。

注意事項：

測試環(huán)境的較大變化，如溫度、濕度和大氣壓力，可能會影響校準過程中的蒸發(fā)，也可能導致測試不可靠。

在開始校準之前，將移液器調(diào)整到校準環(huán)境一個多小時也很重要。

如果我的移液器校準不當怎么辦？

如果您的移液器準確度超過 99-101%，請停止使用移液器并與您的實驗室經(jīng)理或主管交談?？赡苡鞋F(xiàn)有的安排可以讓您的移液器在內(nèi)部或與公司一起進行維修和校準，以確保其正常運行。

在此期間，您可能需要安排使用替代移液器。確保在開始新實驗之前檢查此移液器的準確性。

我的移液器應該多久校準一次？

至少，每 3-6 個月檢查一次移液器校準的情況。如果您要深度清潔移液器，可以在重新組裝后進行檢查。

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