熱門關(guān)鍵詞: CO2搖床 凝膠成像系統(tǒng) 細(xì)胞培養(yǎng)耗材 乳酸分析儀 發(fā)酵罐 Rainin移液槍 振蕩培養(yǎng)箱 生物反應(yīng)器
0512-62956104
博奧龍-腹水專用佐劑-免疫佐劑
貨號 規(guī)格
KX0210048-10 10mL
KX0210048-500 500mL .
佐劑(單抗腹水制備用) 貯存:4℃,避光(有效期3年)
博奧龍-腹水專用佐劑-免疫佐劑是一種預(yù)先注入機(jī)體內(nèi),能增強(qiáng)機(jī)體對抗原的免疫應(yīng)答能力或改變免疫應(yīng) 答類型的輔助物質(zhì)。主要用于在單克隆抗體腹水制備中,在小鼠腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞前, 注射本佐劑到腹腔內(nèi),可以誘導(dǎo)雜交瘤細(xì)胞在腹腔內(nèi)快速增殖,并產(chǎn)生和分泌更多的抗體。 使用該佐劑小鼠腹水會比普通佐劑晚出 1.5 天-2 天,但通常情況下腹水的量是普通佐劑出量 的 1.5-2 倍,且單抗腹水效價(jià)不變。
1 致敏:將佐劑提前取出恢復(fù)至室溫,建議每組細(xì)胞準(zhǔn)備 2-3 只 8-10 周齡雌性 Balb/c 小 鼠,每只小鼠腹腔注射 0.3~0.5mL 腹水專用佐劑。
2 誘導(dǎo):致敏 15 天(一般 12-18 天)后,將篩選出來的雜交瘤細(xì)胞株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后接 種到 Balb/c 小鼠腹腔內(nèi):
2.1 推薦收集對數(shù)生長期細(xì)胞,1000rpm 5min 離心,1×PBS 反復(fù)洗滌 2-3 次,棄掉上 清液;
2.2 用無菌的 1×PBS 緩沖液或生理鹽水,將單克隆的雜交瘤細(xì)胞重懸; 2.3 將細(xì)胞數(shù)調(diào)至約 0.8~1×10 6個每只,0.5mL/只腹腔注射小鼠左側(cè)或右側(cè)的下腹部, 避開肝臟和較低中腹部膀胱,沿腿的角度穿透腹膜,1mL 注射器針頭進(jìn)入 1/3 左 右,有刺空感。
3 腹水收集:注射細(xì)胞 7 天左右小鼠腹部會開始腫脹,此時(shí)每日都應(yīng)進(jìn)行觀察,以防小鼠 突然死亡。
當(dāng)小鼠出現(xiàn)腹部明顯膨大、進(jìn)食困難、行走不便、毛色暗沉?xí)r將小鼠處死, 進(jìn)行一次性腹水的提?。?
3.1 小鼠脫頸椎處死,于 75%酒精浸泡消毒 5min;
3.2 用鑷子提起小鼠腹部外皮,用手術(shù)剪將小鼠腹部剪開一個小口,剝離周圍皮膚露出 腹腔,隨后用 5mL 注射器吸出腹腔內(nèi)全部腹水,或?qū)⒏骨患糸_一個小口,將膠 頭滴管伸入腹腔內(nèi)將積液吸取至干凈的 15mL 離心管內(nèi)。
3.3 3000rpm,10min 離心,無色透明的中間層即為腹水,勿吸取上層中的油狀物及離 心管底部的血細(xì)胞。
4 儲存:離心后可以將腹水轉(zhuǎn)移至新的離心管內(nèi)-20℃凍存,也可與滅菌甘油等比混勻后 放于-20℃冰箱長期保存,若存儲時(shí)間較長,也可轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱。
同一株細(xì)胞誘導(dǎo)收 集的不同小鼠腹水可以合并儲存。
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