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干細胞成骨誘導分化試劑-成人骨髓間充質(zhì)干細胞
中文名稱:成人骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導分化試劑盒
英文名稱:Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit
貨號:BMHX-D101
規(guī)格:200 mL/Kit
質(zhì)檢標準 pH:7.2~7.4
內(nèi)毒素含量:<10 EU/mL
生物安全:細菌、真菌、支原體檢測陰性
質(zhì)量檢測:誘導測試合格
運輸方式:產(chǎn)品冰袋冷藏運輸
產(chǎn)品描述:
干細胞成骨誘導分化試劑是海星生物專為成人骨髓間充質(zhì)干細胞研制優(yōu)化的HyCyteTM成骨誘導分化培養(yǎng)基試 劑盒,用于增強成人骨髓間充質(zhì)干細胞向成骨細 胞方向誘導分化的能力。在庫產(chǎn)品均通過生物安 全檢測和產(chǎn)品質(zhì)量檢測,體系穩(wěn)定有效,現(xiàn)貨供應,性價比高。
| 檢驗原理
茜素紅是一種廣泛應用于生物醫(yī)學樣本檢 驗的示鈣染劑,游離的鈣離子不能與茜素紅形成 紅色沉淀,而固化的鈣質(zhì)結(jié)節(jié)則能被染成紅色。 干細胞在誘導培養(yǎng)基作用下,會逐漸向骨細胞方 向分化,產(chǎn)生明顯的泌鈣反應,形成鈣鹽結(jié)晶或 鈣質(zhì)結(jié)節(jié),均能被茜素紅染色。
干細胞成骨誘導分化試劑使用說明:
1. 成骨誘導分化操作
1.1 明膠包被培養(yǎng)器皿 干細胞培養(yǎng)較長時間后,可能會出現(xiàn)脫壁卷 邊或漂浮現(xiàn)象,建議使用0.1%明膠溶液對培養(yǎng)器 皿進行包被。準備合適的培養(yǎng)器皿,取適量明膠 覆蓋底面,37°C靜置30 min,吸取晾干即可使用。
1.2 接種干細胞 取對數(shù)生長期的細胞, 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的細胞密度接種至包被后的培養(yǎng)器皿中, 于 37℃,5% CO2 培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度 60~70%,棄掉上清,加入成骨誘導分化培養(yǎng)基。
1.3 細胞分化誘導 于37℃,5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約14~21天, 每2~3天換液一次,并注意觀察細胞形態(tài)變化。 根據(jù)細胞鈣鹽結(jié)晶析出和鈣質(zhì)結(jié)節(jié)形成的情況, 決定終止細胞誘導的時間,并進行染色鑒定。
2. 染色鑒定
2.1 細胞固定 吸去培養(yǎng)基使用適量1×PBS清洗一次,棄去 后取適量4%中性甲醛溶液覆蓋培養(yǎng)器皿底面,室 溫固定30~60 min,棄去固定液再使用1×PBS清洗 兩次。
2.2 茜素紅染色 加入適量茜素紅染色液染3~5 min,吸走茜 素紅染色液,用1×PBS清洗兩次,并加入適量1× PBS避免細胞干燥。
2.3 誘導評估 顯微鏡下觀察成骨染色效果,并進行圖像采 集和誘導評估。誘導成功時,鈣質(zhì)結(jié)節(jié)與茜素紅 染料結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。 NOTE: 干細胞的成骨分化水平因細胞類型、細胞供體來 源,培養(yǎng)條件、細胞代次、細胞狀態(tài)和分化時間等因素而異。
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