HyCyte 透析胎牛血清
產(chǎn)品名稱:HyCyte 透析胎牛血清
產(chǎn)品貨號:FBP-X022
血清規(guī)格:50mL
pH:7.00~8.50
總蛋白含量:30~45g/L
血紅蛋白含量:≤200mg/L
內(nèi)毒素水平:≤10 EU/mL
存儲溫度:-15℃以下冷凍保存,避免反復凍融
保質(zhì)期: 5 年
運輸方式:干冰
生物安全檢測: 無細菌、真菌、支原體、病毒等污染
HyCyte 透析胎牛血清產(chǎn)品介紹 :
血清來源于無菌采集的健康胎牛血清
GMP 凈化車間全自動灌裝生產(chǎn)批量大、批間差小(采用 4000L 合罐,最大批量 500mLX7600 瓶)
通過3 次0.1 微米過濾除菌,無需再過濾。在4C條件下,用特定的透析膜對血清在0.15M NaC1中透析,直到血清中葡萄糖含量<5 mg/dL。
HyCyte 透析胎牛血清適用范圍:
用于蛋白質(zhì)組學、同位素標記、細胞水平的藥物篩選等
HyCyte 透析胎牛血清使用方法:
1.將血清從低溫冰箱取出后,先于2-8C冰箱放置 12-24h 使之部分融解然后置于室溫下使之全部融解。在融解過程中,須規(guī)則地搖晃均勻。
2.若一次無法用完 1瓶,建議在無菌環(huán)境下分裝,再冷凍保存,避免反復凍融。
操作 |
溫度 |
100ml |
500ml |
1000ml |
步驟一 |
室溫 |
35 min |
90 min |
100 min |
或15-20℃水浴 |
5 min |
18 min |
20 min |
|
步驟二 |
20℃水浴 |
15 min |
25 min |
30 min |
步驟三 |
37℃水浴 |
20 min |
35 min |
45 min |
| 注意事項
1. 本產(chǎn)品僅用于科研實驗,不可用于其他。
2. 使用產(chǎn)品時應注意無菌操作,避免污染。
3. 操作時請做好防護工作,避免試劑與皮膚黏膜接觸,如有請立即用自來水沖洗。
4. 本產(chǎn)品請在有效期內(nèi)使用,如有破損滲漏,請勿使用。
透析胎牛血清與正常血清區(qū)別
透析胎牛血清牛血清中比較特殊的一種,一些實驗規(guī)定必需要用透析胎牛血清培養(yǎng),透析胎牛血清與正常血清區(qū)別在于:
透析胎牛血清前者透析祛除了分子量在1萬以下的小分子,如葡萄糖、鹽、氨基酸、激素,此外在其他工藝方面沒有任何區(qū)別。
透析胎牛血清也是用于細胞培養(yǎng),但同時,又有自己的一些特殊應用。透析胎牛血清作用如下:
一、摻入研究
例如:研究呼吸道合胞病毒宿主特異性:即為什么它只感染 呼吸道上皮細胞,而不感染其他細胞。
主要操作方法是:將該病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入質(zhì)粒內(nèi),并轉染293T細胞。轉染后第20小時,細胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸。DMEM+透析胎牛血清中培養(yǎng)了45分鐘(讓細胞處于饑餓狀態(tài),因培養(yǎng)基中缺少氨基酸),再在同樣上述培養(yǎng)基中培養(yǎng),但添加了35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸。 培養(yǎng)4小時后進行分析。即裂解細胞,用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進行放射自顯,分析F蛋白的表達情況。發(fā)現(xiàn)F蛋白的表達確實增加了,但突變后的F蛋白表達卻無任何變化。結果證實,野生型的F蛋白確實參與病毒對宿主細胞的侵襲。
二、細胞水平的藥物篩選
例如:從化合物庫中篩選S1P4受體 的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來的免疫激活導致的肺損傷。采用報告基因進行監(jiān)測。為了避免細胞培養(yǎng)環(huán)境中存在的小分子的干擾,就需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 類似在藥物研發(fā)過程中,采用特定啟動子操縱的熒光素酶報告基因,基于細胞平臺的高通量藥物篩選 ,也都需要無外源小分子的培養(yǎng)體系,因而也要用透析胎牛血清。
三、細胞克隆的篩選
由于在進行細胞篩選時,需要無外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。
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