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Taq DNA 聚合酶-Taq DNA Polymerase
產(chǎn)品介紹
Taq DNA Polymerase為來源于嗜熱菌Thermus aquaticus,經(jīng)大腸桿菌重組表達(dá)純化獲得的耐熱性DNA聚合酶,分子量為 94 kDa,與天然Taq DNA 聚合酶具有相同的功能。該酶具有 5'→ 3' 聚 合酶活性和 5'→3' 外切酶活性,但無3'→ 5'外切酶活性。PCR 產(chǎn)物的3' 端帶有突出的 A 堿基,可克隆至
T 載體。
Taq DNA聚合酶,作為一種分子生物學(xué)試劑,在基因克隆、基因表達(dá)分析、基因突變檢測等領(lǐng)域發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。該酶來源于一種嗜熱菌——Thermus aquaticus,通過現(xiàn)代生物技術(shù)手段,在大腸桿菌中進(jìn)行重組表達(dá)和純化,最終獲得了具有耐熱性的DNA聚合酶。
Taq DNA聚合酶的分子量為94 kDa,與天然Taq DNA聚合酶具有相同的功能。這種酶在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中具有以下特點(diǎn):
1. 高耐熱性:Taq DNA聚合酶在高溫下仍能保持活性,適用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的高溫變性、退火和延伸過程。這使得Taq DNA聚合酶成為PCR實(shí)驗(yàn)的理想選擇。
2. 5'→3'聚合酶活性:Taq DNA聚合酶能夠在新合成的DNA鏈的3'端添加脫氧核苷酸,從而實(shí)現(xiàn)DNA的延伸。這種活性是PCR擴(kuò)增過程中是重要的。
3. 5'→3'外切酶活性:Taq DNA聚合酶具有校正功能,可以在一定程度上識別并去除錯誤的核苷酸,提高PCR產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。
4. 無3'→5'外切酶活性:與一些高保真度DNA聚合酶相比,Taq DNA聚合酶不具有3'→5'外切酶活性,因此在一定程度上降低了PCR產(chǎn)物的忠實(shí)度。但這也使得Taq DNA聚合酶在擴(kuò)增過程中具有較高的效率。
5. PCR產(chǎn)物的3'端帶有突出的A堿基:這一特性使得Taq DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物可以方便地克隆至T載體,進(jìn)行后續(xù)的分子克隆和基因表達(dá)分析。
Taq DNA聚合酶的應(yīng)用范圍廣泛,主要包括以下幾個方面:
1. 基因克?。和ㄟ^PCR擴(kuò)增目的基因,并將其克隆至載體,進(jìn)而轉(zhuǎn)化至宿主細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)基因的擴(kuò)增和表達(dá)。
2. 基因表達(dá)分析:利用RT-PCR技術(shù),分析基因在不同組織、發(fā)育階段或處理?xiàng)l件下的表達(dá)水平。
3. 基因突變檢測:通過PCR擴(kuò)增目標(biāo)基因片段,結(jié)合限制性內(nèi)切酶分析、基因測序等方法,檢測基因突變。
總之,Taq DNA聚合酶作為一種重要的分子生物學(xué)試劑,為基因克隆、表達(dá)分析、突變檢測等領(lǐng)域的研究提供了有力支持。
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