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胰酶Trypsin-EDTA 0.25%（含酚紅）

胰酶-胰蛋白酶-胰酶消化液-胰酶價格-0.25%胰酶edta是常用的細胞消化試劑，酶的使用pH值為7.2-9.2。

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胰酶（Trypsin-EDTA 0.25%）（含酚紅）

胰酶消化液

貨號規(guī)格備注

BDXB0020-1 100ml 1×

保存溫度：-20℃

胰酶（Trypsin-EDTA）是常用的細胞分離試劑，為223個氨基酸組成的單鏈多肽，是胰蛋白酶原（Trypsinogen）在Lys6和Ile7之間切除氨基N末端6肽（Hexapeptide）得到的。胰酶屬于絲氨酸水解酶家族，活化位點包括His46和Ser183，胰酶裂解Lysine的羧基末端和 Arginine的氨基末端，水解效率在任何一端存在酸性氨基酸時降低，而當Proline存在于裂解位點的羧基末端一側(cè)時，水解反應不能發(fā)生。胰酶的使用pH值為7.2-9.2。

成分貨號 BDXB0020-1 胰酶 0.25% EDTA·4Na 0.02g/L 酚紅 N/A

操作步驟

注：使用前將胰酶解凍，保存在4℃，建議不要反復凍融。

1. 移除細胞培養(yǎng)瓶/皿中的培養(yǎng)液，用適量不含鈣和鎂離子的PBS或D-PBS快速沖洗細胞 1-2次，完全移除培養(yǎng)瓶/皿中的液體；

2. 加入適量（10cm培養(yǎng)皿加入0.5ml）胰酶，轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶/皿，讓細胞和胰酶充分接觸；

3. 置于37℃培養(yǎng)箱中，孵育1-5min（不同細胞類型有所不同）；

4. 輕輕磕擊培養(yǎng)瓶/皿，在倒置顯微鏡下觀察，大多數(shù)細胞熒光橙懸浮狀態(tài)；

5. 加入培養(yǎng)基，用移液管吹打5-10次，按照實驗要求將細胞種植到新的培養(yǎng)瓶/皿中。

注意事項

1. 胰酶對細胞有損傷，應盡量縮短孵育時間；

2. 如果細胞培養(yǎng)在不含血清的培養(yǎng)基中，胰酶消化完畢，加入PBS，500×g離心10分鐘，移除PBS，將細胞重懸于所用的培養(yǎng)基中。

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