在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，高保真 PCR 技術(shù)是基因克隆、突變分析等精準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)的核心支撐，而 Pfu DNA 聚合酶憑借其獨(dú)特的酶學(xué)特性，成為高保真 PCR 體系中的關(guān)鍵工具。然而，由于其與常規(guī) Taq DNA 聚合酶在活性機(jī)制、反應(yīng)需求上存在顯著差異，科研人員在實(shí)際應(yīng)用中常面臨操作規(guī)范、產(chǎn)物處理、體系優(yōu)化等方面的疑問(wèn)。本文針對(duì) Pfu DNA 聚合酶應(yīng)用中的核心 FAQ，結(jié)合酶學(xué)原理與實(shí)驗(yàn)實(shí)踐，提供系統(tǒng)性解答，助力科研人員高效解決實(shí)驗(yàn)難題。

該策略的核心目的是抑制 Pfu DNA 聚合酶的 3'-5' 外切酶活性對(duì)引物的降解。冰浴環(huán)境可顯著降低酶的活性，避免在體系配制過(guò)程中，酶與引物提前發(fā)生作用導(dǎo)致引物降解；而熱啟動(dòng)操作（60-65℃時(shí)加入酶或直接將體系放入 95℃預(yù)熱的 PCR 儀）能快速將體系帶入高溫變性階段，使模板 DNA 解鏈的同時(shí)，進(jìn)一步阻斷酶對(duì)引物的非特異性降解，從根本上保障 PCR 擴(kuò)增的效率與特異性。

蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、檢測(cè)中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。提供的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)，離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂(lè)楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個(gè)余廠家。